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Tris-Hcl和磷酸盐缓冲液有什么区别

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Tris-Hcl和磷酸盐缓冲液有什么区别

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标签:生物缓冲剂,Tris-HCl,磷酸盐

Tris学名叫三羟甲基氨基甲烷Tris-Cl就是Tris-HCl,只是在写法上有所不同。Tris-HCl就是在Tris-base的溶液中加入适当量的盐酸,调所需要的PH值。Tris缓冲液在生物化学研究中使用的越来越多,有超过磷酸盐缓冲液的趋势,如在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中已都使用Tris缓冲液,而很少再用磷酸盐。

Tris生物缓冲剂

Tris-HCl缓冲液优点

1、常用有效pH范围是在“中性”范围:pH=7.5~8.5                    

2、 Tris-HCl缓冲液稳定,与生理体液的相容性好(Tris-HCl与钙、镁离子不会形成沉淀;相反,磷酸盐与钙、镁离子会产生沉淀)

3、而且相同PH,相同浓度的Tris-HCl缓冲液的离子强度低,这对酶类测定尤为重要,因为大离子强度易致有些酶失活。因此,有时用Tris-HCl代替磷酸盐缓冲液,效果更好。

Tris-HCl缓冲液缺点

1、温度效应大,温度变化对缓冲液pH值的影响很大,即:△pKa/℃=-0.031 ,例如:4℃时缓冲液的pH=8.4,则37℃时的pH=7.4,所以一定要在使用温度下进行配制,室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃~4℃。一旦温度改变,PH将发生明显变化,而致酶活性改变。

2、缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大,缓冲液稀释十倍,pH值的变化大于0.1;

3、此缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用,所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。

4、易吸收空气中的CO2,所以配制的缓冲液要盖严密封。

二、磷酸盐缓冲液优点:

1、磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种生物缓冲剂,由於它们是二级解离,有二个pKa值,所以用它们配制的缓冲液,pH范围最宽:配酸性缓冲液用NaH2PO4,pH=1~4配中性缓冲液用混合的两种磷酸盐,pH=6~8配碱性缓冲液用Na2HPO4,pH=10~12。

2、容易配制成各种浓度的缓冲液;

3、pH受温度的影响小;

4、缓冲液稀释后pH变化小,如稀释十倍后pH的变化小于0.1。

5、 在配制磷酸盐缓冲液是,用钾盐要比用钠盐好,这是因为低温时钾盐比钠盐溶解度要好,但是在配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时,只能用磷酸钠而不能用磷酸钾,因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。

磷酸盐缓冲液缺点:

1、易与常见的钙、镁离子及重金属离子缔合生成沉淀;

2、会抑制某些生物化学过程,如对某些酶的催化作用会产生一定的抑制作用。

针对以上Tris盐缓冲液和磷酸盐缓冲液的优缺点,我们在使用时要根据实际情况选择合适的缓冲体系以确保实验的顺利进行,当然,缓冲剂原材料厂家的选择也非常重要,德晟的缓冲剂产品有严格的质量检验标准,层层把关,能确保把成熟稳定的产品提供给广大客户。

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