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德晟几种发光底物吖啶酯有何区别?

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常见问题

德晟几种发光底物吖啶酯有何区别?

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吖啶酯的名称

吖啶0号:  AE-NHS(传统吖啶酯)

吖啶1号:DMAE-NHS

吖啶2号:Me-DMAE-NHS

吖啶3号:NSP-DMAE-NHS

吖啶4号:NSP-SA-NHS

吖啶5号:NSP-SA

吖啶6号:NSP-SA-ADH

吖啶酯的结构区别

六种吖啶酯,其中1~3号为吖啶酯类;46号为吖啶磺酰胺内盐1~4号为NHS活性酯;5号为吖啶羧酸,含羧基;6号为吖啶酰肼,含有游离氨基。

抗水解性能与稳定性

传统吖啶酯0号(AE-NHS),13号在其结构上进行了修饰,增大了位阻,增强了抗水解性。0号只在酸性溶液中稳定,当pH值大于6.3后易水解,而13号则不然,如在室温下,在pH7.0PB缓冲液中很稳定,16天后,发光活性只降低3.6%。

46号则是引入了磺酰胺基团,其稳定性较吖啶酯类(03号)高, 其原因是由于C-N键与C-O键的键级不同,C-N键大于C-O键。吖啶酰胺类化合物(46号)抵抗水解的能力也强于吖啶酯类(03号)化合物。46号在酸性溶液中(pH<4.8)都很稳定,与蛋白质偶联物在室温下保存4,其光量子产率不降低,冻干品在-20℃,可以保存一年以上.

亲水性

     36号在12号的基础上,在亲水性上进行了修饰,引入了丙磺酸内盐,增加了其水溶性,使其与抗体核酸等形成的标志物有水溶性,在之后的发光检测可以在水中进行。

标记方式的区别

     由于抗体的实质是蛋白,其含有胺基,可直接与1~4号(NHS活性酯)发生反应,进行偶联。

       5号为吖啶羧酸,需要加入缩合剂EDCI等,才能与含胺基的蛋白发生偶联反应。

       6号为吖啶酰肼,含有游离氨基,吖啶酰肼末端适用直接偶联含有醛基的多糖,核酸或者蛋白质等。

发光性能的比较

     由于1~6号吖啶,它们的发光母体与机理一致,其发光性能应该差别不大。

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