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核酸释放剂是如何裂解灭活病毒的

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核酸释放剂是如何裂解灭活病毒的

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核酸释放剂可以裂解细胞或病毒蛋白质外壳,将其中的核酸释放出来,再通过PCR实验进行核酸检测。它有不同的类型,其中灭活型病毒保存液是新冠检测中应用普遍的一种核酸释放剂。

有些地方做核酸检测比较多,也直接把这种灭活型病毒保存液称为核酸释放剂,它最根本的特点是能快速灭活病毒,将病毒蛋白膜衣壳降解掉,同时将病毒核酸(新冠是RNA)释放出来,这样可以进行逆转录后PCR扩增实验,达到利用核酸检测病毒的目的。

 

核酸释放剂如何裂解灭活病毒

裂解病毒的方式有很多种:

  1. 加热法:通常需要加热80到100摄氏度加热5-10分钟,操作很简单,只用一步即可以得到用于核酸PCR扩增的模板,不需要任何离心、抽提等操作步骤,比常用的CheleX100提取方法和苯酚/氯仿方法快。这种方法虽然简单快速,但是提取的核酸含量较少。
  2. 浓盐法:高浓度的盐可以破坏核酸与蛋白质之间的次级键,使核蛋白解联,使病毒核酸释放出来。通常使用盐酸胍、异硫氰酸胍或非胍盐裂解盐,可以直接裂解灭活病毒,不需要加热处理样本,简便快速。

核酸释放剂中除了含有裂解的成分外,通常还含有使蛋白变性破坏膜结构的去污剂如SDS,生物缓冲剂如三羟甲基氨基甲烷Tris,还有防止核酸酶降解核酸的抑制剂如EDTA,以及维持核酸结构稳定的试剂如NaCl等。 裂解体系还可能加入蛋白酶,将蛋白质切成小片段,促进蛋白质与核酸的分离。

核酸释放剂或者灭活病毒保存液是德晟的主打的产品之一,此外为了满足不同的检测需求,还有非灭活型保存液,产品在国内外客户的反馈及工厂供应能力方面都比较理想。

 

问题列表

Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常见的生物缓冲液,可用于整个DNA提取过程。从多种来源提取过程中,DNA对pH敏感。在细胞裂解,去除不需要的细胞成分和沉淀过程中,可以使用tris来维持稳定的pH值。另外,它在细胞裂解中也起到特别重要的作用。
生物缓冲剂是电泳技术的重要组成部分,一般将其添加到溶液当中,以在电流通过样品时使pH稳定。此外,缓冲剂还能提供电泳迁移时所需的离子。
谷氨酸脱氢酶(简写GDH)是生物体代谢途径中一种重要的酶类。该酶广泛存在于各种高等植物、生物及动物体内,它在生物体内氮、碳代谢过程中起着至关重要的作用

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