影响谷氨酸脱氢酶的因素有哪些？

谷氨酸脱氢酶（简写GDH）是生物体代谢途径中一种重要的酶类。该酶广泛存在于各种高等植物、生物及动物体内，它在生物体内氮、碳代谢过程中起着至关重要的作用。为更好地研究谷氨酸脱氢酶的性质和促进该酶的应用，我们先要了解对谷氨酸脱氢酶的各项指标。

1. 谷氨酸脱氢酶PH稳定性的测定

将一定量的谷氨酸脱氢酶稀释至PH4~12的缓冲液中，25℃条件下放置20H。其中，PH4~6为醋酸缓冲液，PH6~8范围为磷酸盐缓冲体系；PH8~10为Tris-CL缓冲体系，PH10~12为甘氨酸缓冲体系。然后37℃条件下测定残存谷氨酸脱氢酶的活力。实验表明该种谷氨酸脱氢酶具有PH作用范围广的优点，在PH5~10范围内稳定性较好，酶残存活力在90%以上。

2. 谷氨酸脱氢酶最适反应温度的测定

温度是影响酶作用的重要因素。酶反应的速度随温度的变化而变化。通常温度每增加10℃，酶反应速度增加1~2倍。在一定条件下，每种酶都有一个最适宜的作用温度。在最适温度下酶的活力最高，作用效果最好。为了测定谷氨酸脱氢酶的活力，取一定量的谷氨酸脱氢酶稀释至PH为8.3的0.1mol/L的Tris-CL缓冲液中，然后在紫外分光光度计上将反应温度分别调整至30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃条件，试剂保温1min，然后加入稀释好的谷氨酸脱氢酶测定活力。实验表明该种谷氨酸脱氢酶的最适反应温度是45℃。

3. 谷氨酸脱氢酶最适PH的测定

酶在一定的较狭的PH值范围内表现出最高活力，这个PH值就是酶作用的最适PH值。高于或低于这一PH值，酶的稳定性下降，活性受到影响。为了测定谷氨酸脱氢酶的最适PH，配制如下种类缓冲液：PH范围为6~7.5的0.1M磷酸钾缓冲液；PH范围为6~7.5的0.1M Tris-HCL缓冲液；PH范围为8.5~10.5的0.1M甘氨酸缓冲液。以上3种缓冲液中含有0.1mol/L的氯化铵、0.01mol/L的α一酮戊二酸和7.5mol/L的NADH。取一定量的谷氨酸脱氢酶稀释至PH为8.3的.01mol/L的Tris-CL缓冲液中。然后37℃条件下测定谷氨酸脱氢酶在不同PH条件下的活力。实验结果表明谷氨酸脱氢酶最适PH值是7.5。

4. 谷氨酸脱氢酶Km值的测定

米氏常数（Km）是酶的特征性常数，Km只与酶的种类、反应体系的PH和反应温度有关系，而与酶的浓度和底物的浓度无关。酶的米氏常数越大，说明需要的底物浓度越高，所以酶的Km数值是反应酶性质优略的重要指标。

德晟研发生产的谷氨酸脱氢酶适用于诊断试剂盒内，而诊断试剂原料用酶属于酶制剂行业的一个小分支，与工业用酶不同，生化诊断试剂用原料酶理化性质要求较高。一种好的诊断试剂原料酶应当具有条件是热稳定性好、PH稳定范围宽，Km数值较低。