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用于色谱分析的10种生物缓冲液

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用于色谱分析的10种生物缓冲液

2021/07/15 13:30
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色谱法是一种实验室技术,常用于蛋白质的分离和纯化。在此过程中,系统的分离能力与pH值变化直接相关。例如,如果流动相(溶剂)的pH值接近pKa,则pH值的微小变化会严重影响保留,从而影响分离结果。由于可电离化合物的保留对该流动相pH值特别敏感,因此应向系统中添加缓冲液以控制该变量。

德晟查阅了色谱中相关的文献,列出了用于该技术的zui常见的生物缓冲液。我们发现,虽然人们一致认为TrisMES通常是zui佳选择,但其他缓冲液也用于阳离子交换色谱、阴离子交换色谱、高效液相色谱(HPLC)和其他类似技术。下面查看我们的清单!

1)BIS-TRIS缓冲液

有用的pH值范围:5.8-7.2pKa(25°C)6.46分子量:209.2g/

用途:阴离子交换层析过程中的缓冲液

担忧:色谱系统中的几个组件可能会与该缓冲液竞争金属结合

2)BES缓冲液

有用的pH值范围:6.4-7.8pKa(25°C)7.09分子量:213.2g/mol

用途:阳离子交换色谱中的结合缓冲液和洗脱液/凝胶过滤色谱中的缓冲液

3)BICINE缓冲液

有用的pH值范围:7.6-9.0pKa(25°C)8.26分子量:163.2/摩尔

用途:阳离子交换色谱中的流动相缓冲液和洗脱液

4)CAPS缓冲液

有用的pH值范围:9.7-11.1pKa(25°C)10.40分子量:221.32g/mol用作:阳离子交换色谱中的结合缓冲液和洗脱液

5)HEPES缓冲液

有用的pH值范围:6.8-8.2pKa(25°C)7.48分子量:238.3g/mol

用途:作为阳离子交换色谱中的结合缓冲液和洗脱液5,6在用于体外释放测试的两阶段反向透析方法中(未发现缓冲液对HPLC的干扰)

6)MES缓冲剂

有用的pH值范围:5.5-6.7pKa(25°C)6.10分子量:195.2g/mol用作:

用途:毛细管电色谱中的缓冲液8凝胶过滤色谱中的缓冲液磷酸纤维素柱色谱中的缓冲液疏水相互作用色谱中的缓冲液阳离子交换色谱中的缓冲液

7)MOPS缓冲剂

有用的pH值范围:6.5-7.9pKa(25°C)7.14分子量:209.3g/mol

用途:色谱中蛋白质纯化的运行缓冲液

8)PIPES缓冲剂

有用的pH值范围:6.1-7.5pKa(25°C)6.76分子量:302.37g/mol用作:

用途:阳离子交换色谱中的缓冲液磷酸纤维素色谱中的缓冲液,用于纯化微管蛋白。注意事项:当用于阳离子交换层析时,由于其离子强度大且浓度依赖于pKa,因此应在较低浓度下使用。

9)TAPS缓冲剂

有用的pH值范围:7.7-9.1pKa(25°C)8.40分子量:243.28g/mol用作:

用途:平面色谱中用于分离染料的缓冲液用于酶纯化的离子交换色谱缓冲液

10)Tris缓冲液

有用的pH值范围:7.5-9.0pKa(25°C)8.06分子量:121.14g/mol

用途:作为阴离子交换色谱中的缓冲液和洗脱由于其低离子迁移率,可用作毛细管电色谱中的缓冲液

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Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常见的生物缓冲液,可用于整个DNA提取过程。从多种来源提取过程中,DNA对pH敏感。在细胞裂解,去除不需要的细胞成分和沉淀过程中,可以使用tris来维持稳定的pH值。另外,它在细胞裂解中也起到特别重要的作用。
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