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细胞培养中不可或缺的竟是它——HEPES缓冲液

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细胞培养中不可或缺的竟是它——HEPES缓冲液

2021/07/20 17:05
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HEPES作为二十多种Good’s试剂之一,使用更多的是在细胞培养上,宽泛的归类到生物缓冲剂中。全称是4-羟乙基哌嗪乙磺酸,也有称2-[4-(羟乙基)-1-哌嗪基]乙磺酸,是一种两性离子磺酸缓冲剂。在1966年诺曼·E·古德(NormanE.Good)提出,hepes是较早被提出的good's缓冲剂。

德晟生物缓冲剂产品大桶包装图

HEPES缓冲液是一种弱酸,常作为有机化工中的两性离子缓冲剂和医药中间体。该物质的分解能力可随温度的升高而增强,随温度的降低而减弱,但与其他缓冲剂相比,它的分解常数随温度变化不大,这使HEPES缓冲液成为在低温时可较好地保持酶的结构和功能的缓冲剂。

HEPES缓冲剂能较长时间控制恒定的pH范围,对细胞无毒性作用,所以用于细胞培养。为了改善BHK一21细胞的培养环境,保持口蹄疫病毒146S抗原的稳定性,提高疫苗内完整病毒颗粒的含量,有专家进行了培养液缓冲系统的研究。在研究中,进行了添加HEPES对病毒抗原稳定性比较试验,评价其保护效果。

根据实验结果表明,用生物缓冲剂HEPES培养的病毒液毒价高于不用生物缓冲剂的病毒液。在37℃条件下,不含生物缓冲剂的病毒液TCID50(半数组织培养感染剂量)变化的幅度比含生物缓冲剂的病毒液大,不过需要注意的是:当HEPES暴露于光线中时,会产生过氧化氢,这对培养的细胞或其它有生物活性的物体产生毒性,因此HEPES作为缓冲液的操作应尽量在避光条件下进行。

因此可以得出,生物缓冲剂可以有效地改善病毒培养液缓冲能力,给病毒提供一个适宜的环境,促进病毒颗粒的稳定性。因其对细胞没有毒性作用,所以德晟科技研发的病毒保存液非灭活型中也含有HEPES缓冲液,在维持pH的同时增加了病毒宿主细胞采样后体外存活时间,最大程度保留病毒核酸及蛋白的完整性,提高检测准确率。有需要HEPES缓冲剂或者病毒保存液的可点击官网或者拨打官网所留的电话联系我们,我们为您提供一站式采购服务。

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Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常见的生物缓冲液,可用于整个DNA提取过程。从多种来源提取过程中,DNA对pH敏感。在细胞裂解,去除不需要的细胞成分和沉淀过程中,可以使用tris来维持稳定的pH值。另外,它在细胞裂解中也起到特别重要的作用。
生物缓冲剂是电泳技术的重要组成部分,一般将其添加到溶液当中,以在电流通过样品时使pH稳定。此外,缓冲剂还能提供电泳迁移时所需的离子。
谷氨酸脱氢酶(简写GDH)是生物体代谢途径中一种重要的酶类。该酶广泛存在于各种高等植物、生物及动物体内,它在生物体内氮、碳代谢过程中起着至关重要的作用

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