选择生物缓冲剂时需要考虑的几个标准

发布时间:

2021-08-13


生物缓冲液最简单的定义是一种能够抵抗因内部和环境因素而导致的氢离子浓度变化的溶液。缓冲液的作用是为了维持系统的pH值。缓冲液的有效缓冲范围取决于缓冲体系中弱酸的解离常数pKa许多因素,如温度或浓度的变化,都会影响缓冲液的pKa。

1966年,诺曼·古德和他的同事开始为生化系统定义比较实用的几种缓冲剂。到了1980年,古德和他的同事们发现了20种缓冲液,它们为生物和生化研究应用设定了标准。古德提出了选择生物缓冲剂的几个标准

 

1.pKa在6到8之间。大多数生化实验的最佳pH值在6到8之间。缓冲液的最佳缓冲范围是缓冲液中弱酸组分(pKa)的离解常数加上或减去1个)pH值单位。

2.在水中的溶解度。大多数情况下,生物反应发生在水性环境中,因此缓冲液应该是水溶性的。

3.生物膜排斥作用。这对所有生化反应都不重要。然而,如果这是您特定实验的重要标准,记住两性离子缓冲液(分子内不同原子上的正电荷和负电荷)不会穿过生物膜是有帮助的。两性离子缓冲液的例子包括MOPS和HEPES;Tris和磷酸盐缓冲液不会异构化为两性离子。

4.较小的盐影响。换言之,缓冲液组分不应相互作用,也不能影响所研究的生化反应中涉及的离子。

5.温度和浓度变化对解离的影响小。通常,随着浓度的变化,解离会发生一些变化。如果这种变化很小,通常可以在不改变缓冲液pH值的情况下稀释储备溶液。然而,有的缓冲液的浓度改变会产生更剧烈的pKa变化,在不显著影响pH值的情况下,储备液不能被稀释。例如,如果您在4.0°C的冷室中制备pH为7.0的Tris缓冲液,并在37°C的相同缓冲液中进行反应,pH值将降至5.95。

6.与矿物阳离子不存在相互作用。如果系统中的缓冲液和阳离子发生反应,缓冲液的效果就会降低,因为它无法处理额外的氢离子。如果缓冲液和所需辅因子(例如锌或镁等金属阳离子)之间形成复合物,您的反应也可能会受到影响。例如,在酶促反应中使用过量的螯合剂可能会导致问题(例如PCR扩增中EDTA浓度过高)。

7.化学稳定性。缓冲液应稳定,在工作条件下不会分解。它不应被氧化或受到使用它的系统的影响。尽量避免使用含有反应参与者的缓冲液(例如,代谢物)。

8.光吸收。缓冲液不应吸收可用于光度实验读数的波长的紫外光。

9.易于使用。缓冲液组分应易于获得和制备。

以上就是古德罗列出来的9点在选择生物缓冲剂时需要考虑的标准,无论您选择何种缓冲液,您都需要考虑温度和环境对缓冲液的影响,并确保您选择的缓冲液与您的系统兼容。德晟作为专业的生物缓冲剂生产商,有着很多年的研发经验,更有专业的技术团队作为支撑,有能力为客户提供价格更加优惠、品质更有保障的产品

生物缓冲液,生物缓冲剂生产商