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PIPES(CAS5625-37-6 )缓冲液与PB缓冲液的区别

2021/09/15 17:05
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PIPESCAS5625-37-6 缓冲液即用哌嗪二乙磺酸配制成的生物缓冲液,是近些年开始使用的一种Goods缓冲剂,而磷酸(PB)缓冲液则是很早就开始使用的缓冲液,都是用在生物学实验及检测中,那么两者有什么区别呢?

磷酸盐缓冲液是生物学实验中使用较早的一种缓冲液,现在也是使用最普遍的一种缓冲液。不过随着检测技术的发展,现在各种生化实验的要求也越来越高,磷酸或磷酸盐缓冲液已经不能满足需求,所以发展出来了多种其它生物缓冲液,TrisHEPESPIPES便是其中几种较常用的。这里暂且说明PIPES缓冲液与PB缓冲液的区别。

磷酸缓冲液的特点

我们知道磷酸是三元酸,在溶液中有二级解离,有两个pKa值,所以用磷酸盐配制的缓冲液,pH范围非常大。一般来说磷酸盐的钾盐比钠盐好,因为低温时钠盐难溶,而钾盐易溶。但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时,只能用磷酸钠,因为SDS会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。磷酸盐缓冲液,适用的pH范围宽,温度影响小,稀释十倍后pH的变化小于0.1。

PIPES缓冲液的特点

磷酸缓冲液缓冲性能好,但是在有金属离子的溶液体系中,磷酸体系会与常见的Ca、Mg离子以及重金属离子缔合生成沉淀。而PIPES则不会与大多数金属离子形成配合物,适合多种蛋白与酶参与的检测体系。PIPES虽然是二元酸,有二级解离,不过它适用用的缓冲范围还是在7左右(解离常数pKa:6.8,缓冲范围6.1-7.5),其二级解离常数非常小可忽略,其不如磷酸缓冲液范围宽。

PIPES缓冲液的缓冲范围虽然不能像磷酸盐缓冲液那样覆盖pH从2-12,不过对于生物学实验来说,很多酶和蛋白适应的pH值都是在7左右,所以PIPES缓冲剂的性能还是更优一些。德晟生产的缓冲剂有很多,可大包装提供PIPES、HEPES、Tris等缓冲剂原料。

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Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常见的生物缓冲液,可用于整个DNA提取过程。从多种来源提取过程中,DNA对pH敏感。在细胞裂解,去除不需要的细胞成分和沉淀过程中,可以使用tris来维持稳定的pH值。另外,它在细胞裂解中也起到特别重要的作用。
生物缓冲剂是电泳技术的重要组成部分,一般将其添加到溶液当中,以在电流通过样品时使pH稳定。此外,缓冲剂还能提供电泳迁移时所需的离子。
谷氨酸脱氢酶(简写GDH)是生物体代谢途径中一种重要的酶类。该酶广泛存在于各种高等植物、生物及动物体内,它在生物体内氮、碳代谢过程中起着至关重要的作用

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