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吖啶酯的溶解为什么用非质子化溶剂

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吖啶酯的溶解为什么用非质子化溶剂

2021/12/03 13:30
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吖啶酯是一种灵敏度非常高的化学发光试剂,可用于肿瘤、细胞因子、抗原抗体等一些非常微量的物质的检测,自动化程度高,干扰背景小。不过有些人表示在使用吖啶酯时,不知道怎么去溶解,这里介绍如何溶解吖啶酯。

吖啶酯的溶解方法

吖啶酯通常是以冻干粉的形式低温避光保存的,在使用时第一步就是将其配成溶液。吖啶酯在检测过程中通常是直接标记蛋白、抗体或核酸的,检测环境一般为水溶液,所以一些吖啶酯都会增加一些抗水解与亲水性的基团。那么是不是就是用水来溶解吖啶酯呢?

答案是否定的,吖啶酯本身是非常容易水解的,尤其是含有NHS基团的吖啶酯,对谁非常敏感。所以吖啶酯不可用水去溶解,需要用非质子化溶剂,常用的溶剂比如DMF或者DMSO都是可以使用的。在后续的化学发光免疫反应中,就可以在水溶液的环境中完成了。

吖啶酯的标记基团

吖啶酯上通常使用NHS标记基团,可以直接与蛋白上的一级氨基相连接,同时脱去N-羟基琥珀酰亚胺。吖啶酯标记完成后,与被标记物之间以酰胺键或者酯键等形式存在,就可以稳定存在于弱酸性缓冲中了,含有抗水解性基团与亲水基团的还可以稳定于中性水溶液。吖啶酯本身活性位点在碱性和氧化环境下不稳定,偶联后用弱酸性的缓冲液,鼓氮气除去氧气

吖啶酯试剂有很多类型,目前德晟研发的有6中型号,为了保证吖啶酯的稳定,都是以冻干粉的形式保存在冷冻柜。我们在使用的时候再拿出来,将吖啶酯溶解,配制成溶液,注意是现配现用,不要长时间保存。

 

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