MBTH-TOOS显色系统在检测胰蛋白酶中的应用

纳米酶作为一种新型的人工酶，近年来成为催化和生物医学领域的研究热点。然而，纳米酶的应用受到不同底物催化活性变化和特异性低的限制。本研究表明，当3-甲基-2-苯并噻唑啉酮盐酸盐(MBTH) 和n-乙基-n-(2-羟基-3-磺丙基）-间甲苯胺钠盐（TOOS）用作显色底物时，柠檬酸盐封端的铂纳米颗粒(Cit-PtNPs) 在不同pH值下表现出比其他铂纳米酶更强的氧化酶样活性。

这一现象对于不同纳米酶在催化中选择显色底物具有重要的参考价值。在MBTH-TOOS显色系统中，MBTH自由基首先在反应过程中通过Cit-PtNPs的催化氧化产生，后者与 TOOS反应生成无色化合物，最后无色化合物歧化产生蓝紫色醌染料。Cit-PtNPs类氧化酶活性的催化机制是在催化过程中同时进行二电子还原过程和四电子还原过程。

此外，为了解决金属纳米酶特异性低的问题，设计了鱼精蛋白作为Cit-PtNPs的聚集促进剂和胰蛋白酶的特异性水解底物。在这项工作中，通过提高Cit-PtNPs 在pH=8下的氧化酶活性来实现胰蛋白酶的一步检测。Cit-PtNPs的催化活性与胰蛋白酶的浓度成正比。胰蛋白酶的线性范围为1.0-70.0 ng/mL，检测限为0.6 ng/mL。这种新方法也已成功应用于检测尿样中的抑制剂和胰蛋白酶。

TOOS可以应用于多种检测项目，在血糖代谢项目中用于制备葡萄糖检测试剂、糖化白蛋白检测试剂等，还可以用于肝功能常规检查项目，它和牛血清白蛋白、乙二胺四乙酸二钠等组成腺苷脱氨酶检测试剂，具有显色效果好，反应迅速、稳定、测定精密度高等优点，除此之外TOOS还用于甘油三酯和胆固醇检测等项目的诊断试剂中，在临床诊断中具有重要价值。

德晟科技研制的色原底物TOOS具有纯度高，水溶性高，干扰杂质离子少的特点，使用时集配即用，非常方便，不仅晶体形态好，而且在颜色反应强度以及褪色方面均有较好的表现，欢迎广大科研工作者及经销商同仁前来咨询选购.