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TRIS-HCl、TRIS等生物缓冲剂在细胞疗法中的使用

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TRIS-HCl、TRIS等生物缓冲剂在细胞疗法中的使用

2022/04/21 13:30
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在细胞治疗期间,有时会使用生物缓冲液来分离细胞进行培养,现在介绍一下细胞疗法中使用的三种生物缓冲剂TRIS-HCLTRISCHAPS

TRIS-HCl:

用于酯印迹分析:将脑组织和共培养细胞溶解在冰冷的裂解缓冲液(20 mM Tris–HClpH 7.51 mM EDTA5 mM MgCl21 mM 二硫苏糖醇,0.1 mM 苯甲基磺酰氟加蛋白酶抑制剂鸡尾酒。将裂解物离心。

荧光标记 FCS 的制备: 然后将样品添加到溶解在 5 ml DMSO 中的 0.5 g FITC 中。剧烈摇动 10 分钟后,将反应在 4°C 下孵育 16 小时,然后加入 0.1 体积的 1 M Tris-HCl 缓冲液 (pH 8.0) 停止反应。

对于肿瘤免疫治疗:首先将氯化锰(MnCl2)溶液加入OVA溶液中并在搅拌下孵育20分钟。将DAP溶液滴入上述溶液中,并通过三(羟甲基)氨基甲烷-氯化氢(Tris-HCl)缓冲液将混合物的pH值调节至pH 7.8-8

用于治疗肝癌细胞:人工底物的酶测定 对于 MMP-1(胶原酶-1)测定,酶活性在反应缓冲液 [300 mM NaCl10 mM CaCl20.005% Brij350.01% NaN3 50 mM Tris-HCl (pH 7.5)] 使用 20 μM MOAc-Pro-Leu-Gly-Leu-A2pr(Dnp)-Ala-Arg-NH2 作为底物(在 25°C 下孵育 90 分钟)。

在裂解缓冲液、结合缓冲液、洗涤缓冲液和洗脱缓冲液中用于抗原靶向癌症免疫治疗、重组大 HSP 和肿瘤蛋白抗原的制备。

TRIS

用于检测源自骨髓间充质干细胞 (BM-MSCs) NPCs 的外泌体在其与相应细胞相互作用中的作用。使用含有 50 mM Tris (pH 7.4)1% Triton X-100150 mM NaCl1% 脱氧胆酸钠、0.1% SDS RIPA (Beyotime Biotechnology) 裂解来自这两种细胞的 BM-MSCNPC 和外泌体、EDTA、原钒酸钠、氟化钠、亮肽素和 1 mM PMSF

评估用于心脏细胞治疗的干细胞 DNA 完整性,对于细胞裂解缓冲液,将 100 mL 裂解缓冲液(2.5 M NaCl0.1 M EDTA10 mM Tris1% Triton X-100)溶解在去离子水 (DIH2O) 中。然后,加入 10 M NaOH pH 值调节至 10.0。将缓冲液冷却至 4°C

应用于帕金森病,PVDF 膜用缓冲液(0.05% Triton 0.9% NaCl 50 mM TrispH 7.3)洗涤,浸入封闭液 60 分钟,然后在室温下与二抗反应 1小时。

CHAPS

用于 HLA 配体的分离。使用标准免疫亲和纯化分离 HLA I 类分子。在含有 蛋白酶抑制剂的 10 mM CHAPS/PBS 中裂解速冻 GSC 颗粒或速冻原发性胶质母细胞瘤组织样品。

用于有效的 apo-IDO1 抑制剂癌症免疫疗法。重组 IDO1 活性测定如前所述测量 25°C 37°C 下的重组 IDO1 活性:100 nM holo-IDO1 100 mM 磷酸钾缓冲液 (pH 7.2) 1 mM CHAPS 中添加 0.5% (v:v) 过氧化氢酶将 (25 µl) 添加到 DMSO 载体(0.5 µl DMSO 体积)中的抑制剂中,并在指定的时间和温度下孵育(可变)。

湖北新德晟是一家从事生物缓冲剂生产的厂家,目前所生产的生物缓冲剂种类很多,包括TRIS缓冲剂、TRIS-HCL缓冲剂、CHAPS缓冲剂等,是一家集研发生产于一体的生产商,如果有购买需求欢迎与我们取得联系!

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Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常见的生物缓冲液,可用于整个DNA提取过程。从多种来源提取过程中,DNA对pH敏感。在细胞裂解,去除不需要的细胞成分和沉淀过程中,可以使用tris来维持稳定的pH值。另外,它在细胞裂解中也起到特别重要的作用。
生物缓冲剂是电泳技术的重要组成部分,一般将其添加到溶液当中,以在电流通过样品时使pH稳定。此外,缓冲剂还能提供电泳迁移时所需的离子。
谷氨酸脱氢酶(简写GDH)是生物体代谢途径中一种重要的酶类。该酶广泛存在于各种高等植物、生物及动物体内,它在生物体内氮、碳代谢过程中起着至关重要的作用

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