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生物缓冲剂HEPES、MOPS在冷冻保存中的应用

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生物缓冲剂HEPES、MOPS在冷冻保存中的应用

2022/04/26 13:30
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冷冻保存是生物领域中最常见的过程。在细胞培养过程中,有时需要将细胞储存起来以供后续研究或用于细胞治疗,这样可以为患者保存更多的细胞。在冷冻过程中,冷冻引起的不稳定变化对细胞产生不同的影响。如果操作不慎,极有可能导致细胞在冷冻过程中不经意间坏死而达不到要求。因此,科学家们对此非常重视,必须针对不同细胞系的样本进行不同的溶液配方研究,以创造最佳结果。

延续上一阶段的细胞治疗,本阶段将介绍细胞冷冻保存时的相关注意事项: 由于体外保存细胞需要极高的稳定性和严格的生存环境要求,为了使细胞能够长期保存,冷冻保存技术用于将细胞储存在液氮中,使细胞代谢反应进入静止期。一次再解冻一次。在冻融过程中,培养基会遇到结晶、溶质沉淀、极性变化、pH变化、浓度变化等问题。在这里,我们将提供结晶、浓度变化和 pH 变化的解决方案。

解决此类问题,目前有两种方法: 慢速冷冻法和玻璃化冷冻法,通过慢速冷冻,让细胞内的水分子有足够的时间排出,并加入冷冻保存剂,防止细胞内外的水分子形成太大的冰晶,使它们尽可能完全脱水。玻璃化冷冻:培养基中加入较高浓度的冷冻保存剂,利用快速冷冻的方法,在短时间内快速置换细胞内的水分,使细胞内的液体变成高粘度、高浓度的玻璃化物质,减少冰晶

HEPES

Na-P (20 – 100 mM) 50 mM HEPES 溶液混合的结果;在预期的浓度范围内没有观察到重大的酸度变化。在文献中,分别使用 5mM 50 mM 两种 Na-P 浓度来比较不同的 HEPES 浓度(0~30 mmol L-1)(图 3),与不含 Na-P 的样品(图 2)相比。 H2 -值非常明显。

MOPS

20 mM MOPS 50 mM Na-P 的混合结果中,H2- 值增加到(7.49 ± 0.0503),酸度变化相对稳定。

MES

为了尽量减少 pH 值的变化,所需的 MES 浓度在 5 mM Na-P 中约为 12 mM,在 50 mM Na-P 中约为 80 mM

生物缓冲液的选择是生物制药生产过程中的关键步骤。理想的缓冲剂可以减少生物制剂在整个制造和储存过程中的降解。德晟生产高品质 HEPESMOPSMES。此外,我们还可以根据您的应用提供特殊的检测服务,如生物负载、内毒素、重金属、DNase/RNase/蛋白酶活性检测等。无论如何,德晟都是您购买生物缓冲液的较好选择!

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问题列表

Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常见的生物缓冲液,可用于整个DNA提取过程。从多种来源提取过程中,DNA对pH敏感。在细胞裂解,去除不需要的细胞成分和沉淀过程中,可以使用tris来维持稳定的pH值。另外,它在细胞裂解中也起到特别重要的作用。
生物缓冲剂是电泳技术的重要组成部分,一般将其添加到溶液当中,以在电流通过样品时使pH稳定。此外,缓冲剂还能提供电泳迁移时所需的离子。
谷氨酸脱氢酶(简写GDH)是生物体代谢途径中一种重要的酶类。该酶广泛存在于各种高等植物、生物及动物体内,它在生物体内氮、碳代谢过程中起着至关重要的作用

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