TRIS缓冲剂在核酸琼脂糖电泳中的应用与制备

Tris缓冲液是核酸琼脂糖电泳中不可或缺的组成部分，大多数电泳缓冲液都用 Tris 缓冲。在核酸琼脂糖电泳中使用的两种主要的缓冲液是 TBE（Tris 硼酸盐/EDTA）和 TAE（Tris 醋酸盐/EDTA）。

TRIS粉末

尽管不同形式的 DNA 的分辨率及其在电泳过程中的迁移率存在一些差异，但 Tris 缓冲液及衍生液通常可以互换使用。TBE 中的硼酸盐离子会抑制许多酶，如果在电泳后不进行某种类型的 DNA 纯化，某些酶介导的下游操作可能不起作用。所以在大多数 DNA 实验室中，TAE 缓冲液更适合日常使用。

制作 Tris 缓冲溶液的两种方法

1、制备所需浓度的 Tris 碱和 Tris HCl 溶液，将一种溶液（通常是 Tris HCl）的等分试样添加到另一种（通常是 Tris 碱）溶液中，同时监测 pH 值，直到获得正确的 pH 值。

2、将适量的Tris粉末溶解在水中，用HCl调节pH，然后将缓冲液配制成所需体积，如果在调节 pH 时没有过冲，这种方法不会改变离子强度。一旦过冲和用 NaOH 重新调整后，或使用 Tris HCl 并用 NaOH 调整 pH 值后，离子强度会发生变化。

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