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蛋白酶K简介

2022/06/16 13:30
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蛋白酶K是一种分离自白色念珠菌的枯草溶解蛋白酶,CAS39450-01-6。它可以溶解组蛋白,降解杂蛋白,使溶菌酶和核糖核酸酶失活释放DNA。我司生产的蛋白酶K是一种干粉,可在0~4℃条件下低温保存2。溶解后是无色透明的液体,-20储存半年,分装使用,不能反复冷冻。

下面德晟小编带你了解下蛋白酶K3个主要优点。

1.蛋白酶K耐活性很强,在多种反应条件下均有活性。在较宽的PH值范围(4-12.5)和较高的温度(50-65)内均能用于提取DNAEDTA螯合剂SDS去垢剂均不能直接影响蛋白酶K的活性。在提取纯化蛋白质时,会加入EDTA沉淀钙离子。虽然钙离子能保持蛋白酶K的热稳定性,阻止蛋白酶K自我溶解调节蛋白酶K的底物结合位点但它会影响实验的结果,且不是保持蛋白酶K的必要物质。

2.蛋白酶K的酶解速度很快,且不会降解目标产物。裂解细胞时,蛋白酶K消化细胞表面的蛋白质,抑制DNA酶活性释放分离出DNA。加入去污剂后,蛋白酶K消化溶液中的RNA酶并使其失活从而分离出RNA

3.蛋白酶K的切割能力广泛。蛋白酶K是一种非特异性蛋白内切酶,可以切割脂肪族氨基酸、疏水性氨基酸和芳香族氨基酸羧基端连接的酯键和肽键。

蛋白酶K的浓度会影响细胞的结构因此对于蛋白酶K的使用,德晟推介50-100 µg/ml浓度用于蛋白质去除和灭活酶;低于2mg/ml的浓度用于处理组织;配套使用50mMTRIS-HCL缓冲液和10mM浓度的CaCl用于角蛋白的消耗.经过不断的探索与技术的革新,德晟生产蛋白酶K的纯化技术,冻干工艺成熟,且可提供配套的生物缓冲剂用于DNA/RNA的提取分离实验中,稳定溶液的PH值。

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Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常见的生物缓冲液,可用于整个DNA提取过程。从多种来源提取过程中,DNA对pH敏感。在细胞裂解,去除不需要的细胞成分和沉淀过程中,可以使用tris来维持稳定的pH值。另外,它在细胞裂解中也起到特别重要的作用。
生物缓冲剂是电泳技术的重要组成部分,一般将其添加到溶液当中,以在电流通过样品时使pH稳定。此外,缓冲剂还能提供电泳迁移时所需的离子。
谷氨酸脱氢酶(简写GDH)是生物体代谢途径中一种重要的酶类。该酶广泛存在于各种高等植物、生物及动物体内,它在生物体内氮、碳代谢过程中起着至关重要的作用

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