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浅谈鲁米诺的发光检测方法

2019/05/15 14:40
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       有些小伙伴会问我,你经常介绍鲁米诺是化学发光检测试剂,它都有几种检测方法啊?小编我总是不厌其烦告诉他们,有三种,分别是加入催化剂加快发光,加入抑制剂间接测定,及通过偶合间接测定。

 

加入催化剂是目前常运用的方法。通常情况下,过氧化氢与鲁米诺发光体系的化学发光反应非常缓慢,而在加入了某些催化剂后,反应则变的非常迅速。

 

这里有人会问,这些催化剂的存在会不会影响到整个体系啊。这里小编要说,催化剂的存在是指在反应结束时,催化剂的性质和量保持不变,即相对于整个反应,催化剂是没有参与的。同时在这些催化剂在一定浓度时是可以被检测出来的,对于整个检测的影响几乎可以忽略。

 

目前鲁米诺主要的催化剂有一些金属配合物、过渡金属离子,金属配合物主要有血红蛋白,过氧化酶;过渡金属离子主要有Fe3+、Fe2+、Mn2+、Cr2+等。在化学发光免疫分析中我们会经常用到的催化剂是过氧化物,特别是辣根过氧化物酶。一些化合物可以与过氧化物酶标记的抗体进行免疫反应,然后与鲁米诺进行化学发光测定,进而测定这些化合物或抗体。如地高辛、乙型肝炎表面抗原等都是通过这类方法进行检测分析的。

 

除去催化剂对检测的加速,在研究中还发现了一些抑制剂,这些有机物可以抑制鲁米诺的化学发光,如含有酚羟基团的还原性化合物,在反应过程中能与氧化剂反应,降低了氧化剂的浓度,使化学发光强度降低,从而间接测定这类有机物质。

 

最后,小编要介绍的这种方法是通过偶合反应进行间接测定,小编这里的偶合反应是指将能够产生或者消耗化学发光反应物的一个反应与另一个化学发光反应结合起来,从而可以实现某些物质的间接化学发光测定。如一些底物在某些酶的作用下产生过氧化氢再与鲁米诺产生化学发光,通过测定化学发光,可以间接地知道测定底物的纯度。

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