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蛋白质的PVDF转膜缓冲剂CAPS

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蛋白质的PVDF转膜缓冲剂CAPS

2019/07/26 17:34
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3-(环己胺)-1-丙磺酸CAPS是一种应用广泛的缓冲剂,也叫N-环己基-3-氨基丙磺酸。很多生物试验以及生化试剂盒里都会用到。

现在蛋白质的PVDF转膜已经不用Tris-gly、SDS、20%甲醇缓冲液,因为缓冲液中有甘氨酸,所以测序的时候很难区分甘氨酸是Buffer带进去还是蛋白质本身的,现在测序用的转膜缓冲液是10mM/1CAPS10%甲醇,CAPS电印记缓冲液中的甲醇浓度范围是0~20%,一般甲醇浓度高的缓冲液对低分子量蛋白质的转移效果好,而甲醇浓度低甚至不含甲醇的缓冲液则有利于高分子量蛋白的转移。

 转膜操作时,要准备好电转槽,电泳仪,0.45um(适用于20KD以上蛋白)及0.22um(适用于20KD以下蛋白)孔径的PVDF膜,切成略大于凝胶大小,两张Whatman 3MM 滤纸,切成与凝胶大小,甲醇(100%),DD水。CAPS电印迹缓冲液(母液)要用去离子水溶解,用2mol/L NaOH 将pH值调至11.0,然后定容至,贮存于4ºC。 CAPS电印迹缓冲液(工作液,含10%甲醇的1×CAPS,临用前混合)染色液0.1%考马斯亮蓝G-250 40%甲醇/1%乙酸,脱色液50%甲醇。

德晟科技自05年就开始研发生产血液检测体外诊断方面试剂,对色原底物新型Trinder's试剂、生物缓冲剂及化学发光试剂有着较深的研究。

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