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CAPS应用作HPLC分离碱性药物的缓冲液

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CAPS应用作HPLC分离碱性药物的缓冲液

2019/08/21 17:30
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在生化实验中常用3-环己胺基丙磺酸CAPS用作HPLC法分离碱性药物的缓冲液,那么HPLC分离的原理是什么呢?

HPLC高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液(比如CAPS)等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。

色谱柱是HPLC分离过程中的核心。高压-压力可达 150~300Kg/cm2,色谱柱每米降压为 75 Kg/cm2 以上,高速-流速为 0.1~10.0 ml/min,高效-可达 5000 塔板每米,在一根柱中同时分离成份可达 100 种。高灵敏度-紫外检测器灵敏度可达 0.01ng。同时消耗样品少。

HPLC高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。HPLC有很多优点:

速度快-通常分析一个样品在 15~30 min,有些样品甚至在 5 min 内即可完成。分辨率高-可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果:

灵敏度高-紫外检测器可达 0.01ng,荧光和电化学检测器可达 0.1pg。柱子可反复使用-用一根色谱柱可分离不同的化合物;

样品量少,容易回收-样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。

因此通常采用HPLC法分离碱性药物,其中德晟科技生产的CAPS用作分离体系的缓冲剂。

德晟科技自05年就开始研发生产血液检测体外诊断方面试剂,对色原底物新型Trinder's试剂、生物缓冲剂及化学发光试剂有着较深的研究。

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1.从外观上,优质的卡波姆应为白色松散粉末,或稍带有淡黄色,如果颜色较深,则说明产品不够纯净含有色杂质
从外观上,优质的卡波姆应为白色松散粉末,或稍带有淡黄色,如果颜色较深,则说明产品不够纯净含有色杂质。

2. 从手感上,卡波姆940应是比较轻、比较松散的,由于其分子是高度聚合的长链,分子间比较松散,如果产品粉末相对紧实,则说明丙烯酸聚合反应控制不佳,聚合度不均匀或者分子大小不一等等;这样产品应用时耐剪切性、凝胶透明度、增稠性就相对差一些。

3. 从气味上,由于卡波姆本身是聚丙烯酸或聚羧基乙烯,含有酸性基团羧基,聚合物也不易挥发,有微弱的酸性气味;如果味道较重或者有其它气味,则可能是生产干燥过程中溶剂有残留。

4. 从凝胶透明度上,用水或乙醇溶解后,形成的凝胶应该透明清亮,而且凝胶均匀,如果凝胶浑浊透光性差则会严重影响使用。
1.卡波姆980与940相比,聚合物的分子更大,在不同浓度、温度、pH值等条件下,各自的粘度变化和流变性变化表现也不一样,各自耐离子性和耐剪切性也有差异。
2. 卡波姆980在应力的动态震荡下表现出了弹性,940则差一些但更易于涂抹均匀。

3.当离子存在或浓度增加时,980与940透明度影响都很小,但980耐离子性比940更高,所以能离子增加时980能提供相对更高的粘度及屈服值。
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