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CAPS应用作HPLC分离碱性药物的缓冲液

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CAPS应用作HPLC分离碱性药物的缓冲液

2019/08/21 17:30
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在生化实验中常用3-环己胺基丙磺酸CAPS用作HPLC法分离碱性药物的缓冲液,那么HPLC分离的原理是什么呢?

HPLC高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液(比如CAPS)等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。

色谱柱是HPLC分离过程中的核心。高压-压力可达 150~300Kg/cm2,色谱柱每米降压为 75 Kg/cm2 以上,高速-流速为 0.1~10.0 ml/min,高效-可达 5000 塔板每米,在一根柱中同时分离成份可达 100 种。高灵敏度-紫外检测器灵敏度可达 0.01ng。同时消耗样品少。

HPLC高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法(正相与反相)、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。HPLC有很多优点:

速度快-通常分析一个样品在 15~30 min,有些样品甚至在 5 min 内即可完成。分辨率高-可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果:

灵敏度高-紫外检测器可达 0.01ng,荧光和电化学检测器可达 0.1pg。柱子可反复使用-用一根色谱柱可分离不同的化合物;

样品量少,容易回收-样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。

因此通常采用HPLC法分离碱性药物,其中德晟科技生产的CAPS用作分离体系的缓冲剂。

德晟科技自05年就开始研发生产血液检测体外诊断方面试剂,对色原底物新型Trinder's试剂、生物缓冲剂及化学发光试剂有着较深的研究。

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Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常见的生物缓冲液,可用于整个DNA提取过程。从多种来源提取过程中,DNA对pH敏感。在细胞裂解,去除不需要的细胞成分和沉淀过程中,可以使用tris来维持稳定的pH值。另外,它在细胞裂解中也起到特别重要的作用。
生物缓冲剂是电泳技术的重要组成部分,一般将其添加到溶液当中,以在电流通过样品时使pH稳定。此外,缓冲剂还能提供电泳迁移时所需的离子。
谷氨酸脱氢酶(简写GDH)是生物体代谢途径中一种重要的酶类。该酶广泛存在于各种高等植物、生物及动物体内,它在生物体内氮、碳代谢过程中起着至关重要的作用

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