中文  |  EN

欢迎来到德晟生化科技有限公司!

搜索

咨询热线:18062302654

 

>
>
Folin酚法检测蛋白原理及采用缓冲剂EPPS、Tris等注意事项

精品案例

国内案例
国外案例

 

地址:湖北省鄂州市光谷联合科技城C8-2-2
电话: 0711-3702650     18062302654 
邮件:
18062302654@163.com
邮编:436032
传真 :0711-3704589

CopyRight © 2019-2027    武汉德晟生化科技有限公司, All Right Reserved
鄂ICP备案:16017126号   网站建设:中企动力武汉

资讯详情

Folin酚法检测蛋白原理及采用缓冲剂EPPS、Tris等注意事项

2019/08/22 17:30
浏览量

Folin酚法检测蛋白含量时通常用EPPS(HEPPS)作缓冲剂。Folin—酚试剂法是由测定蛋白质浓度的基本方法,在生物化学领域得到广泛的应用。

Folin酚法的显色原理与双缩脲方法是相同的(但EPPS不能用于缩二脲/双缩脲)检测,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。

Folin酚法检测蛋白含量的优点是灵敏度高,比双缩脲法灵敏得多,缺点是费时较长,要严格控制操作时间,标准曲线也不是严格的直线形式,且专一性较差,干扰物质较多。凡干扰双缩脲反应的基团,如-CO-NH2, -CH2-NH2, CS-NH2以及Tris缓冲液、蔗糖、硫酸铵、巯基化合物均可干扰Folin—酚反应,而且对后者的影响还要大得多。此外,酚类、柠檬酸对此反应也有干扰作用。

Folin—酚试剂由甲试剂和乙试剂组成。甲试剂由碳酸钠,氢氧化钠,硫酸铜及酒石酸钾钠组成。蛋白质中的肽键在碱性条件下,与酒石酸钾钠铜盐溶液起作用,生成紫红色络合物。乙试剂是由磷钼酸和磷钨酸、硫酸、溴等组成。此试剂在碱性条件下,易被蛋白质中酪氨酸的酚基还原呈蓝色反应,其色泽深浅与蛋白质含量成正比。此法也适用于测定酪氨酸和色氨酸的含量。本法可测定范围是25—250μg蛋白质。

需要注意的是:

1.Folin-酚乙试剂在酸性条件下较稳定,而Folin-酚甲试剂是在碱性条件下与蛋白质作用生成碱性的铜-蛋白质溶液。当Folin-酚乙试剂加入后,应迅速摇匀(加一管摇一管),使还原反应产生在磷钼酸-磷钨酸试剂被破坏之前。

2.血清稀释的倍数应使蛋白质含量在标准曲线范围之内,若超过此范围应将血清酌情稀释。

德晟科技自05年就开始研发生产血液检测体外诊断方面试剂,对色原底物新型Trinder's试剂、生物缓冲剂及化学发光试剂有着较深的研究。

德晟新闻资讯

问题列表

酶制剂是指从生物中提取的具有酶特性的一类物质,酶制剂是所有的活的有机体所产生的有氨基酸组成的蛋白质,可以控制许多的反应过程和织物、动物、人类以及微生物的生物活动。具有高效性、专一性,在适宜条件(pH和温度)下具有活性。
化学发光分析法因其具有灵敏度高、线性范围宽、仪器操作简单等优点,被广泛用于药物及生化样品的直接测定。剧烈的化学反应常同时伴随有热和光的产生,光的产生通常和体系在高温时的辐射有关,往往溶液浓度不同,混合方式不同,发光强度也会不同。
肝功能检查是临床常规体检项目之一,目的在于诊断肝脏有无疾病或者检查肝脏的损害程度以及查明肝脏疾病的原因。一直以来,都提倡清晨空腹状态是最好的采血检查时机,且现行的参考区间也是以空腹采血为标准的,那么在肝功检查中,非空腹状态下抽血检查会对肝功结果存在明显的影响吗?

联系德晟

地址:湖北省鄂州市光谷联合科技城C8
电话:18062302654

微信:whdsbio
邮件:
18062302654@163.com
邮编:436032
传真:0711-3704589