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采用EPPS缓冲剂的磷酸化反应

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采用EPPS缓冲剂的磷酸化反应

2019/08/23 17:30
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生物缓冲剂EPPS(HEPPS)即4-羟乙基哌嗪丙磺酸有很多相似于HEPES(4-羟乙基哌嗪乙磺酸)的特性。因为EPPS有高的缓冲范围,适合用于磷酸化反应,特别是Tricine不能使用的情况下。磷酸化反应是生物体内非常重要的生化反应。

磷酸化是通过磷酸转移酶(激酶)将磷酸基团加在底物上的过程。其中除去磷酸基团的酶称为磷酸酶。 蛋白质磷酸化可发生在许多种类的氨基酸(蛋白质的主要单位)上,其中以丝氨酸为多,接着是苏氨酸。

 

除了蛋白质以外,底物开可以是核苷酸,如三磷酸腺苷(ATP)或三磷酸鸟苷(GTP)的形成,也是经由二磷酸腺苷和二磷酸鸟苷的磷酸化而来,此过程称为氧化磷酸化。另外在许多糖类的生化反应中(如糖解作用),也有一些步骤存在氧化磷酸化作用。

蛋白质的磷酸化主要集中在肽链中的酪氨酸、丝氨酸、苏氨酸残基上,这些残基上具有游离的羟基,且本身不带电荷,当磷酸化作用后,蛋白质便具有了电荷,从而使结构发生变化,进一步引起蛋白质活性的变化,这也是蛋白质磷酸化的意义所在。

磷酸化反应的pH要求严格,需要高反冲范围的缓冲剂,通常会用Tris三羟甲基氨基甲烷或者Tricine,在Tricine不能用的情况下,用EPPS是非常合适的。

德晟科技自05年就开始研发生产血液检测体外诊断方面试剂,对色原底物新型Trinder's试剂、生物缓冲剂及化学发光试剂有着较深的研究。

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