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Tris在缓冲液TAE以及TBE中的实际应用

2019/08/30 17:30
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通常Tris缓冲剂会配合盐酸HCl仪器使用,比如分离蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳中,此外我们在进行DNA电泳时还会把Tris配成TAE或者TBE缓冲液。

缓冲溶液TAE 三羟基氨基甲烷Tris+乙酸+EDTA);缓冲液TBE(三羟基氨基甲烷Tris+硼酸+EDTA )

以下列出TAE与TBE的配方以及配配制方法,供大家查询使用:

TAE缓冲液

实验之中经常将TAE配制成10× 或者 50× 的储液,实验前稀释储液到1×的工作液。 

1x TAE 缓冲液的成分是:

40 mM Tris (pH 7.6)

20 mM acetic acid

1 mM EDTA

50x TAE储液配制方法:

Tris(FW=121) 242g,100 ml 0.5 M EDTA, 57.1 ml的冰醋酸溶解在600 ml的去离子水中;而后调节pH至8.3,加去离子水定容至1L后,室温保存。使用时稀释50倍 即为1×TAE Buffer。

TBE缓冲液

TBE缓冲液可以配置成 5× 或者 10×的储液。

1x TBE 缓冲液的成分是:

89 mM Tris (pH 7.6)

89 mM boric acid

2 mM EDTA

10x TBE 储液配制方法:

Tris(FW=121)108g,硼酸(FW=61.8)55g,40 ml 0.5 M EDTA 溶解在600 ml的去离子水中;而后调节pH至8.3,加去离子水定容至1L后,室温保存。使用时稀释10倍 即为1×TBE Buffer。

德晟科技自05年就开始研发生产血液检测体外诊断方面试剂,对色原底物新型Trinder's试剂、生物缓冲剂及化学发光试剂有着较深的研究。

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1.从外观上,优质的卡波姆应为白色松散粉末,或稍带有淡黄色,如果颜色较深,则说明产品不够纯净含有色杂质
从外观上,优质的卡波姆应为白色松散粉末,或稍带有淡黄色,如果颜色较深,则说明产品不够纯净含有色杂质。

2. 从手感上,卡波姆940应是比较轻、比较松散的,由于其分子是高度聚合的长链,分子间比较松散,如果产品粉末相对紧实,则说明丙烯酸聚合反应控制不佳,聚合度不均匀或者分子大小不一等等;这样产品应用时耐剪切性、凝胶透明度、增稠性就相对差一些。

3. 从气味上,由于卡波姆本身是聚丙烯酸或聚羧基乙烯,含有酸性基团羧基,聚合物也不易挥发,有微弱的酸性气味;如果味道较重或者有其它气味,则可能是生产干燥过程中溶剂有残留。

4. 从凝胶透明度上,用水或乙醇溶解后,形成的凝胶应该透明清亮,而且凝胶均匀,如果凝胶浑浊透光性差则会严重影响使用。
1.卡波姆980与940相比,聚合物的分子更大,在不同浓度、温度、pH值等条件下,各自的粘度变化和流变性变化表现也不一样,各自耐离子性和耐剪切性也有差异。
2. 卡波姆980在应力的动态震荡下表现出了弹性,940则差一些但更易于涂抹均匀。

3.当离子存在或浓度增加时,980与940透明度影响都很小,但980耐离子性比940更高,所以能离子增加时980能提供相对更高的粘度及屈服值。
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