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PBS缓冲液与TBS缓冲液的区别

2019/09/16 17:30
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在我们的生化实验中,应用最为广泛的缓冲液有PBS缓冲液和用Tris配制的TBS缓冲液。它们的作用都是调节反应体系的pH值,但又有各自的区别。今年来,TBS的应用越来越多,有超过磷酸盐缓冲液的趋势。

PBS是磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline)一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。它是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液,主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4它们有二级解离,缓冲的pH值范围很广;而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。

PBS磷酸缓冲盐溶液不仅伪狂犬病毒要用它稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释,比如稀释血清。原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用,蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应,所以使用PBS是首选。PBS也不是万能的,有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高,就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分,维持最佳的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性。

但是,在在有金属离子的溶液体系中,磷酸体系会与常见的Ca离子、Mg离子以及重金属离子缔合生成沉淀。在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中已都使用Tris缓冲液,而很少再用磷酸盐。

TBSTris-HCl缓冲盐溶液Tris Buffered,Saline)或缓冲生理盐水配制方法是:先以重蒸水少许溶解NaCl3.5~9g0.15mol/L),再加0.5mol/L Tris-HCl缓冲液100mL,最后加重蒸水至1000ml,充分摇匀使Tris终浓度为0.05mol/L。TBS常用于免疫酶技术中漂洗标本,通常还搭配去污剂Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚,一种非离子型表面活性剂)一起使用。

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