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TE缓冲液中Tris与EDTA的搭配使用

2019/09/19 17:30
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我们的主要产品之一三羟甲基氨基甲烷Tris缓冲液在生物化学研究中使用的越来越多,有超过磷酸盐缓冲液的趋势。Tris可以搭配很多试剂使用,比如TE缓冲液就是由TrisEDTA配制而成的。

TE缓冲液是由TrisEDTA组成的缓冲体系,主要用于溶解核酸,能稳定储存DNARNATE缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液。在生物体中有三种主要的pH缓冲体系,它们是蛋白质、碳酸盐缓冲体系和磷酸盐缓冲体系。每种缓冲体系所占的分量在各类细胞和器官中是不同的。

电泳时用的TE缓冲液组分EDTA非常重要,目的是螯合Mg2+等离子,防止电泳时激活DNA酶。由于核酸酶需要这些离子,EDTA可以将这些离子牢牢抓住,避免核酸降解。但要注意的是,镁离子同时是很多酵素的辅助因子,如限制酶、DNA聚合酶等等,因此EDTA的浓度一般不会太高(通常在1mM左右)。

Tris缓冲剂往往是搭配使用,在生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不仅仅只有缓冲液的pH值,而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的反应。生化实验室常常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等系统。硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖,磷酸盐:在有些实验,它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物,重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。

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