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磷酸盐缓冲液简介

2019/09/19 17:30
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在我们生化实验比如色原底物的Trinder’s反应以及发光底物吖啶酯以及各种酶反应都会用到生物缓冲剂,常用的有Bicine、Tris、MOPS等,以及最基础的醋酸盐、磷酸盐缓冲体系等。可以说只要是对反应环境有pH要求的系统中都需要用到缓冲剂

缓冲液之所以能调节pH,是因为其是弱电解质,在溶液中部分解离,部分以分子形式存在不表现酸碱性,其分子与其离子形式的共轭酸或共轭碱形成动态平衡(pH=pKa+lg解离浓度比未解离浓度),若体系pH改变,次动态平衡会移动以达成新的平衡,从而调节了pH。

一个缓冲体系的有效缓冲范围,通常是在pKa值为中点的两个pH单位范围内,即:缓冲剂的有效pH范围=pKa±1,所以,当缓冲溶液的pH等于该缓冲剂的pKa时,缓冲能力最大。若要设计一个新的缓冲体系时,只需按所要求的pH值查出pKa值等于此pH值的各种缓冲剂并从中进行挑选即可。

在生物化学实验中,常用的生物缓冲剂有很多,磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛且最基础的一种缓冲剂,磷酸是三元酸由於它们是二级解离,有二个pKa值,所以用它们配制的缓冲液,pH范围最宽,用钾盐比钠盐好,因为低温时钠盐难溶,钾盐易溶,但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时,只能用磷酸钠而不能用磷酸钾,因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。磷酸盐容易配置成各种浓度的缓冲液,适用的pH范围宽,pH受温度影响的影响小,稀释后pH变化小,稀释十倍后pH的变化小于0.1。但是,在在有金属离子的溶液体系中,磷酸体系会与常见的Ca离子、Mg离子以及重金属离子缔合生成沉淀。

我们生产的Tris缓冲液在生物化学研究中使用的越来越多,有超过磷酸盐缓冲液的趋势,如在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中已都使用Tris缓冲液,而很少再用磷酸盐。 在我们的PRP采血管中使用的ACD液需要用到柠檬酸钠和柠檬酸来调节pH,这里的柠檬酸盐不仅调节了渗透压也是起到了缓冲液的作用,跟磷酸一样也是三元酸。通常Tris缓冲剂与HCl、EDTA、醋酸、硼酸及甘氨酸等搭配使用,以及其它类型的缓冲体系,将在后面文章再做介绍。

德晟科技自05年就开始研发生产分离胶、肝素、EDTA钾盐等采血管添加剂,以及体外诊断方面试剂,对色原底物TOOS、MAOS等新型Trinder's试剂、Bicine、Tris等生物缓冲剂及鲁米诺、吖啶酯等化学发光试剂有着较深的研究,在自主研发及合成方面具有专业优势。

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