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缓冲剂MOPS吗啉丙磺酸与MES吗啉乙磺酸的配制方法

2019/10/09 17:00
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在我们生产缓冲剂产品中,非常常用的有MOPS 3-吗啉丙磺酸,除此之外其实2-吗啉乙磺酸MES也用得很普遍。主要作用都是在生化实验中用来稳定体系pH值在实验中起非常重要的作用,那二者之间有什么区别?又该如何配置呢?本文将为大家进行简单介绍。

 MOPS Buffer,即3-吗啉丙磺酸缓冲液,属于生物缓冲剂,缓冲pH范围在6.5~7.9之间,适用于叶绿体薄层备样的电子传递和磷酸化研究;可以配制成多种琼脂培养基,在极限培养基中作为无毒缓冲液应用于棒状链霉菌的培养和头孢菌素的生产;可作为二维凝胶电泳中等电聚焦电泳(IEF)的电解质系统成分;还可应用于Northern Blot(RNA印迹杂交),作为RNA的分离和转膜时的缓冲液。 

 

 常用的10×MOPS Buffer配制方法如下:

 

 

 

 

(1)称量41.8 g MOPS,溶解于约700mL DEPC处理水中;

 

 

(2)使用2 N NaOH 调节pH值至7.0;

(3)向溶液中加入DEPC处理的1M NaOAc 20mL、0.5M EDTA(pH8.0) 20mL;

(4)定容至1 L,用0.45 um 滤膜过滤除去杂质,室温避光保存。

MES Buffer,即2-吗啉乙磺酸,生物缓冲剂,缓冲范围为pH5.5–6.7,MES缓冲剂的pKa 值接近生理pH, 应用于活性氨基凝胶层析柱分离脑微管蛋白的流动相成分;MES在通过细胞膜的时候不能被吸收,而且可透过紫外线,这类生物学缓冲液普遍用于植物细胞的培养物中。

 配置方法:配置MES缓冲液与其他大多数缓冲区相同。假设配置pH为6,浓度为100mM的MES缓冲液1L:

(1)称量0.1mol或者19.5g MES,溶解于500mL DEPC水中

(2)用1N或者10N的NaOH溶液调节pH至6.0

(3)定容至1L,4°C保存。

综上所述,在选择缓冲液时,不仅要依据所需缓冲范围和缓冲溶液的缓冲能力,还要依据具体的实验内容。除此之外,在生物实验中,还要注意所用到的容器、水和其他添加液的灭菌,以免给实验带来其他的影响因素。

德晟科技自05年就开始研发生产分离胶、肝素、EDTA钾盐等采血管添加剂,以及体外诊断方面试剂,对色原底物TOOS、MAOS等新型Trinder's试剂、Bicine、Tris、Mops等生物缓冲剂及鲁米诺、吖啶酯等化学发光试剂有着较深的研究,在自主研发及合成方面具有专业优势。

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