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色原底物HDAOS在检测总胆固醇试剂盒中的应用

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色原底物HDAOS在检测总胆固醇试剂盒中的应用

2019/11/27 17:00
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总胆固醇的测定方法超过上百种,可分为化学试剂比色法、酶分析法、荧光法、气相和高效液相色谱 法等五大类。由于气相和高效液相色谱法条件高,采用色原底物如HDAOS的酶法测定总胆固醇是目前最常规应用方法,其优点是快速准确、专一性强、样本用量少、不需抽提,便于自动化分析 和批量测定。

胆固醇又称胆甾醇。一种环戊烷多氢菲的衍生物。血清中总胆固醇(total cholesterolTC)包括游离胆固醇(free cholesterolFC)和胆固醇酯(cholesterol esterCE)两部分。血清中胆固醇酯可被胆固醇酯酶水解为游离胆固醇和游离脂肪酸(FFA),胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作用下生成4-胆甾烯酮和过氧化氢。生成的过氧化氢在3-AAP色原底物HDAOS以及过氧化物酶存在时,可生成红色醌亚胺类物质,用分光光度计检测颜色深浅,颜色深浅与检测对象中TC含量成正比。

检测总胆固醇需要准备的试剂有:pH6.7Goods缓冲剂50mmol/L,胆固醇酯酶 ≥200U/L,胆固醇氧化酶 ≥100U/L,过氧化物酶 ≥3000U/L4-AAP0.3mmol/LHDAOS5mmol/L,还要胆固醇标准溶液大约5mmoL/L。血清TC浓度等于测定管与标准吸光度比值乘以胆固醇标准溶液的浓度。

检测中需要注意的是:试剂中酶的质量影响测定结果;若需检测游离胆固醇浓度,将酶试剂成分中去掉胆固醇酯酶即可;检测标本可为血清或者血浆(肝素或EDTAK2抗凝)。血清TC参考值:3.05.20mmol/L;危险阈值:5.206.20mmol/L;高胆固醇血症:≥6.20mmol/L

德晟科技自05年就开始研发生产分离胶、肝素、EDTA钾盐等采血管添加剂,以及体外诊断方面试剂,对色原底物TOOSMAOS等新型Trinder's试剂、BicineTris等生物缓冲剂及鲁米诺、吖啶酯等化学发光试剂有着较深的研究,在自主研发及合成方面具有专业优势。

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