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吖啶酯化学发光标记中缓冲液组分的介绍

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吖啶酯化学发光标记中缓冲液组分的介绍

2019/12/18 17:00
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在化学发光免疫检测实验时,我们需要将吖啶酯标记抗体,将磁珠联结抗体,然后同待测抗原产生特异性免疫,三者形成复合物,这一系列的过程每一步都做好,才能实现一个结果准确的检测,所以除了吖啶酯、抗体、磁珠对实验只管重要外,反应体系的缓冲液也是很重要的。

吖啶酯化学发光中需要用到的缓冲液组分有很多,抗体载体采用链霉亲和素磁珠或羧基磁珠所用的缓冲液也不一样。例如采用链霉亲和素磁珠的方法中需要用到的有pH7.4PBS0.1%BSA0.02%NaN3等。这里一一介绍不同的组分。

PBS即磷酸缓冲液,在蛋白或抗体捕获时,是用于维持反应环境pH值的。BSA(第五组分)牛血清白蛋白Albumin from bovine serumwestern blot中作为Blocking agent;在酶切反应缓冲液中加入BSA,通过提高溶液中蛋白质的浓度,对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附,能减轻有些酶的变性,能减轻有些不利环境因素如加热,表面张力及化学因素引起的变性。NaN3就是叠氮钠,这个一般是防腐剂,有剧毒、易爆需要注意。PBST就是在PBS缓冲液中加入了Tween20,山梨醇酐单月桂酸酯聚氧乙烯(20)醚,吐温20为水包油(O/W)型乳化剂,可作增溶剂、扩散剂、稳定剂。在核酸捕获时,缓冲液用pH7.5Tris-HCl+EDTA+氯化钠;在RNA捕获时用DEPC(焦碳酸二乙酯)RNA酶抑制剂处理的氢氧化钠+氯化钠溶液。

德晟科技自05年就开始研发生产分离胶、肝素、EDTA钾盐等采血管添加剂,以及体外诊断方面试剂,对色原底物TOOSMAOS等新型Trinder's试剂、BicineTris等生物缓冲剂及鲁米诺、吖啶酯等化学发光试剂有着较深的研究,在自主研发及合成方面具有专业优势。

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1.从外观上,优质的卡波姆应为白色松散粉末,或稍带有淡黄色,如果颜色较深,则说明产品不够纯净含有色杂质
从外观上,优质的卡波姆应为白色松散粉末,或稍带有淡黄色,如果颜色较深,则说明产品不够纯净含有色杂质。

2. 从手感上,卡波姆940应是比较轻、比较松散的,由于其分子是高度聚合的长链,分子间比较松散,如果产品粉末相对紧实,则说明丙烯酸聚合反应控制不佳,聚合度不均匀或者分子大小不一等等;这样产品应用时耐剪切性、凝胶透明度、增稠性就相对差一些。

3. 从气味上,由于卡波姆本身是聚丙烯酸或聚羧基乙烯,含有酸性基团羧基,聚合物也不易挥发,有微弱的酸性气味;如果味道较重或者有其它气味,则可能是生产干燥过程中溶剂有残留。

4. 从凝胶透明度上,用水或乙醇溶解后,形成的凝胶应该透明清亮,而且凝胶均匀,如果凝胶浑浊透光性差则会严重影响使用。
1.卡波姆980与940相比,聚合物的分子更大,在不同浓度、温度、pH值等条件下,各自的粘度变化和流变性变化表现也不一样,各自耐离子性和耐剪切性也有差异。
2. 卡波姆980在应力的动态震荡下表现出了弹性,940则差一些但更易于涂抹均匀。

3.当离子存在或浓度增加时,980与940透明度影响都很小,但980耐离子性比940更高,所以能离子增加时980能提供相对更高的粘度及屈服值。
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