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吖啶酯化学发光标记中缓冲液组分的介绍

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吖啶酯化学发光标记中缓冲液组分的介绍

2019/12/18 17:00
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在化学发光免疫检测实验时,我们需要将吖啶酯标记抗体,将磁珠联结抗体,然后同待测抗原产生特异性免疫,三者形成复合物,这一系列的过程每一步都做好,才能实现一个结果准确的检测,所以除了吖啶酯、抗体、磁珠对实验只管重要外,反应体系的缓冲液也是很重要的。

吖啶酯化学发光中需要用到的缓冲液组分有很多,抗体载体采用链霉亲和素磁珠或羧基磁珠所用的缓冲液也不一样。例如采用链霉亲和素磁珠的方法中需要用到的有pH7.4PBS0.1%BSA0.02%NaN3等。这里一一介绍不同的组分。

PBS即磷酸缓冲液,在蛋白或抗体捕获时,是用于维持反应环境pH值的。BSA(第五组分)牛血清白蛋白Albumin from bovine serumwestern blot中作为Blocking agent;在酶切反应缓冲液中加入BSA,通过提高溶液中蛋白质的浓度,对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附,能减轻有些酶的变性,能减轻有些不利环境因素如加热,表面张力及化学因素引起的变性。NaN3就是叠氮钠,这个一般是防腐剂,有剧毒、易爆需要注意。PBST就是在PBS缓冲液中加入了Tween20,山梨醇酐单月桂酸酯聚氧乙烯(20)醚,吐温20为水包油(O/W)型乳化剂,可作增溶剂、扩散剂、稳定剂。在核酸捕获时,缓冲液用pH7.5Tris-HCl+EDTA+氯化钠;在RNA捕获时用DEPC(焦碳酸二乙酯)RNA酶抑制剂处理的氢氧化钠+氯化钠溶液。

德晟科技自05年就开始研发生产分离胶、肝素、EDTA钾盐等采血管添加剂,以及体外诊断方面试剂,对色原底物TOOSMAOS等新型Trinder's试剂、BicineTris等生物缓冲剂及鲁米诺、吖啶酯等化学发光试剂有着较深的研究,在自主研发及合成方面具有专业优势。

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