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Trinder’s反应中过氧化物酶的理化性质

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Trinder’s反应中过氧化物酶的理化性质

2019/12/25 17:00
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在试剂盒中,色原底物TOPSDAOS以及化学发光剂鲁米诺都需要使用过氧化物酶POD,这对于整个检测是很关键的,因此想要更好的做好检测就需要用好过氧化物酶,也就需要了解过氧化物酶的理化性质。

首先,所有酶的催化活性都对反应体系的pH有要求,需要配置合适的缓冲溶液来维持反应体系的pH值。过氧化物酶POD也不例外,但过氧化物酶一般都含有多种同工酶,因此最适pH范围比较宽。酸性状态下,过氧化物酶血红素与蛋白质部分分离,酶蛋白从天然状态变成可逆变性状态,活力下降,且热稳定性低;在中性和碱性状态,酶处于天然状态,蛋白质结构含α-螺旋结构,稳定,酸化后结构破坏,产生β-结构。

POD的反应除了对pH有要求外,对温度也有要求。不同来源的过氧化物酶最适作用温度存在着很大的差别,一般是35-60℃。如马铃薯的POD最适温度是55℃,而花菜中的POD只有35~40℃。

POD的热失活特性具有双相性和可逆性,它含有不同的耐热性质部分,不耐热部分热处理时很快失活,而耐热部分在同样地温度是缓慢地失活。经过热处理的POD酶液在室温或者较低温度下保藏,其活力部分可以再生。热失活的POD聚集成寡聚体,不停展开和堆积之后血红素基暴露,会增加非酶催化脂肪氧化的能力。不同来源的POD也具有不同的耐热性,一般植物的POD酶活越高的,其耐热性也越高。低水分含量也会增加POD的耐热性。降低pH和增加氯化钠浓度也会增加酶失活的速度。

德晟科技自05年就开始研发生产分离胶、肝素、EDTA钾盐等采血管添加剂,以及体外诊断方面试剂,对色原底物TOOSMAOS等新型Trinder's试剂、BicineTris等生物缓冲剂及鲁米诺、吖啶酯等化学发光试剂有着较深的研究,在自主研发及合成方面具有专业优势。

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1.从外观上,优质的卡波姆应为白色松散粉末,或稍带有淡黄色,如果颜色较深,则说明产品不够纯净含有色杂质
从外观上,优质的卡波姆应为白色松散粉末,或稍带有淡黄色,如果颜色较深,则说明产品不够纯净含有色杂质。

2. 从手感上,卡波姆940应是比较轻、比较松散的,由于其分子是高度聚合的长链,分子间比较松散,如果产品粉末相对紧实,则说明丙烯酸聚合反应控制不佳,聚合度不均匀或者分子大小不一等等;这样产品应用时耐剪切性、凝胶透明度、增稠性就相对差一些。

3. 从气味上,由于卡波姆本身是聚丙烯酸或聚羧基乙烯,含有酸性基团羧基,聚合物也不易挥发,有微弱的酸性气味;如果味道较重或者有其它气味,则可能是生产干燥过程中溶剂有残留。

4. 从凝胶透明度上,用水或乙醇溶解后,形成的凝胶应该透明清亮,而且凝胶均匀,如果凝胶浑浊透光性差则会严重影响使用。
1.卡波姆980与940相比,聚合物的分子更大,在不同浓度、温度、pH值等条件下,各自的粘度变化和流变性变化表现也不一样,各自耐离子性和耐剪切性也有差异。
2. 卡波姆980在应力的动态震荡下表现出了弹性,940则差一些但更易于涂抹均匀。

3.当离子存在或浓度增加时,980与940透明度影响都很小,但980耐离子性比940更高,所以能离子增加时980能提供相对更高的粘度及屈服值。
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