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Trinder’s反应中过氧化物酶的理化性质

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Trinder’s反应中过氧化物酶的理化性质

2019/12/25 17:00
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在试剂盒中,色原底物TOPSDAOS以及化学发光剂鲁米诺都需要使用过氧化物酶POD,这对于整个检测是很关键的,因此想要更好的做好检测就需要用好过氧化物酶,也就需要了解过氧化物酶的理化性质。

首先,所有酶的催化活性都对反应体系的pH有要求,需要配置合适的缓冲溶液来维持反应体系的pH值。过氧化物酶POD也不例外,但过氧化物酶一般都含有多种同工酶,因此最适pH范围比较宽。酸性状态下,过氧化物酶血红素与蛋白质部分分离,酶蛋白从天然状态变成可逆变性状态,活力下降,且热稳定性低;在中性和碱性状态,酶处于天然状态,蛋白质结构含α-螺旋结构,稳定,酸化后结构破坏,产生β-结构。

POD的反应除了对pH有要求外,对温度也有要求。不同来源的过氧化物酶最适作用温度存在着很大的差别,一般是35-60℃。如马铃薯的POD最适温度是55℃,而花菜中的POD只有35~40℃。

POD的热失活特性具有双相性和可逆性,它含有不同的耐热性质部分,不耐热部分热处理时很快失活,而耐热部分在同样地温度是缓慢地失活。经过热处理的POD酶液在室温或者较低温度下保藏,其活力部分可以再生。热失活的POD聚集成寡聚体,不停展开和堆积之后血红素基暴露,会增加非酶催化脂肪氧化的能力。不同来源的POD也具有不同的耐热性,一般植物的POD酶活越高的,其耐热性也越高。低水分含量也会增加POD的耐热性。降低pH和增加氯化钠浓度也会增加酶失活的速度。

德晟科技自05年就开始研发生产分离胶、肝素、EDTA钾盐等采血管添加剂,以及体外诊断方面试剂,对色原底物TOOSMAOS等新型Trinder's试剂、BicineTris等生物缓冲剂及鲁米诺、吖啶酯等化学发光试剂有着较深的研究,在自主研发及合成方面具有专业优势。

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