Trinder’s反应中过氧化物酶的理化性质

在试剂盒中，色原底物TOPS、DAOS以及化学发光剂鲁米诺都需要使用过氧化物酶POD，这对于整个检测是很关键的，因此想要更好的做好检测就需要用好过氧化物酶，也就需要了解过氧化物酶的理化性质。

首先，所有酶的催化活性都对反应体系的pH有要求，需要配置合适的缓冲溶液来维持反应体系的pH值。过氧化物酶POD也不例外，但过氧化物酶一般都含有多种同工酶，因此最适pH范围比较宽。酸性状态下，过氧化物酶血红素与蛋白质部分分离，酶蛋白从天然状态变成可逆变性状态，活力下降，且热稳定性低；在中性和碱性状态，酶处于天然状态，蛋白质结构含α-螺旋结构，稳定，酸化后结构破坏，产生β-结构。

POD的反应除了对pH有要求外，对温度也有要求。不同来源的过氧化物酶最适作用温度存在着很大的差别，一般是35-60℃。如马铃薯的POD最适温度是55℃，而花菜中的POD只有35~40℃。

POD的热失活特性具有双相性和可逆性，它含有不同的耐热性质部分，不耐热部分热处理时很快失活，而耐热部分在同样地温度是缓慢地失活。经过热处理的POD酶液在室温或者较低温度下保藏，其活力部分可以再生。热失活的POD聚集成寡聚体，不停展开和堆积之后血红素基暴露，会增加非酶催化脂肪氧化的能力。不同来源的POD也具有不同的耐热性，一般植物的POD酶活越高的，其耐热性也越高。低水分含量也会增加POD的耐热性。降低pH和增加氯化钠浓度也会增加酶失活的速度。

德晟科技自05年就开始研发生产分离胶、肝素、EDTA钾盐等采血管添加剂，以及体外诊断方面试剂，对色原底物TOOS、MAOS等新型Trinder's试剂、Bicine、Tris等生物缓冲剂及鲁米诺、吖啶酯等化学发光试剂有着较深的研究，在自主研发及合成方面具有专业优势。