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化学发光试剂吖啶酯和鲁米诺的比较

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化学发光试剂吖啶酯和鲁米诺的比较

2019/12/26 17:00
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我们生产的化学发光试剂主要有吖啶酯类和鲁米诺类两种类型,这两种化学发光底物都是化学发光免疫检测分析CLIA中应用非常广泛的试剂。两者有很大的区别,吖啶酯与鲁米诺相比,最直观的是灵敏度要高很多,同样的价格也高很多,以下作更详细的比较。

鲁米诺、异鲁米诺及其衍生物是最早使用的一类化学发光物质但其应用于化学发光免疫分析(CLIA)需要使用催化剂过氧化物酶POD及增强剂这将导致背景发光增强使测量本底升高从而限制了这一技术的灵敏度和它的应用及发展。吖啶酯的发光效率高且发光体系简单不需要加入催化剂本底低标记简单。由于传统吖啶酯AE-NHS的热稳定性不是很好,此后人们又相继研究合成了较AE-NHS更稳定的吖啶酯衍生物并应用于CLIA。例如DMAE-NHS被证明具有良好的热稳定性和发光性能。

吖啶盐和相关化合物已被广泛证明为非常有用的化学发光标记物,其稳定性、标记特异性和检测灵敏度都超越放射性同位素。其中吖啶-NHS酯能与蛋白质的一级氨基发生反应。在碱性条件下,NHS作为离去基团被取代,蛋白质与吖啶酯形成稳定的酰胺键。反应完成后,多余的吖啶盐通过脱盐柱除去。在碱性过氧化氢存在下,吖啶标记的蛋白不需要过氧化物酶催化就可自行发光。因此,激发液的加入导致反应体系立即释放约430nm的光子,通过使用标准光度计(luminometer)计数光子数量就可检测蛋白质的浓度。因为此发光过程是十分短暂(整个过程在2秒钟内完成),样品必须直接放在光度计内部光子探测器前面。蛋白质、多肽、抗体、核酸都可以用吖啶酯标记。标记化合物在碱性过氧化氢的激发下快速发光,通过收集光子可以检测到标记化合物。

德晟科技自05年就开始研发生产分离胶、肝素、EDTA钾盐等采血管添加剂,以及体外诊断方面试剂,对色原底物TOOSMAOS等新型Trinder's试剂、BicineTris等生物缓冲剂及鲁米诺、吖啶酯等化学发光试剂有着较深的研究,在自主研发及合成方面具有专业优势。

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