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HEPES和Tris缓冲液有哪些不同?
在生物化学实验中,缓冲溶液起着不可或缺的作用,它能够抵制外界少量强酸和强碱的影响,为体系维持最贴近生理环境的pH值。HEPES缓冲液和Tris缓冲液都是生物实验中常用的缓冲液,而很多人常常会有疑惑:二者之间有哪些不同呢?本文将进行对比总结。
简介及应用
HEPES(4-羟乙基哌嗪乙磺酸):是一种两性离子生物缓冲剂,属于新型显色试剂,有效缓冲范围6.8~8.2,可广泛应用于多种生物化学反应,并在某些细胞培养基中用作缓冲试剂。其使用终浓度为10~50mmol/L,一般培养液内含20mmol/L即可达到缓冲能力。此外,由于无细胞毒性,HEPES缓冲液常用于细胞器和极易变性的、对pH敏感的蛋白质和酶的研究工作,以及生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。
Tris缓冲液:三羟甲基氨基甲烷(Tris)为弱碱性,在25°C下pKa为8.1,其缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0~9.2之间,在生物化学实验中常用的pH值为6.8、7.4、8.0、8.8。常在电泳和凝胶实验中起缓冲作用,并被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还可用于线虫的中间纤维的形成。其衍生的TE、TAE、TBE等缓冲液,常用于DNA的稳定、存储以及提取。
HEPES缓冲液的特征:
1、pKa值介于6.0和8.0之间;
2、在水中具有高溶解度;
3、具有膜不透性,不易穿透生物膜;
4、 对生化反应影响有限,可耐化学作用和酶解作用,且不与金属离子生成复合物或沉淀;
5、有极低的可见光和紫外光吸收;
6、离子浓度、溶液组成和温度对解离的影响小;
Tris缓冲液的特征
1、本身呈碱性,只用Tris-HCl缓冲体系即可配制pH范围由酸性到碱性的缓冲液,并且可以与其他物质组成多种缓冲体系,如TE、TBS、TAE、TBE等衍生缓冲液;
2、对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀;
3、受溶液浓度影响大,稀释十倍,pH值变化大于0.1;
4、受环境影响较大,一般来说,温度每升高一度,pH值下降0.03;易吸收空气中的CO2。
综上所述,HEPES和Tris缓冲液在缓冲范围、应用领域、以及特征上都有一定的差别,在具体实验中,需要对实验条件进行仔细分析,以选择最合适的缓冲体系。德晟科技目前生产研发的HEPES和Tris缓冲剂,原料充足,发货速度快,纯度≥99%,可用于低温生化研究以及作为各种诊断试剂盒的原材料,一流的研发设备,专业的科研团队,将为客户提供一流的品质服务与保障。