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HEPES和Tris缓冲液有哪些不同?

2019/12/27 13:00
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在生物化学实验中,缓冲溶液起着不可或缺的作用,它能够抵制外界少量强酸和强碱的影响,为体系维持最贴近生理环境的pH值。HEPES缓冲液和Tris缓冲液都是生物实验中常用的缓冲液,而很多人常常会有疑惑:二者之间有哪些不同呢?本文将进行对比总结。

简介及应用

HEPES4-羟乙基哌嗪乙磺酸):是一种两性离子生物缓冲剂,属于新型显色试剂,有效缓冲范围6.8~8.2,可广泛应用于多种生物化学反应,并在某些细胞培养基中用作缓冲试剂。其使用终浓度为10~50mmol/L,一般培养液内含20mmol/L即可达到缓冲能力。此外,由于无细胞毒性,HEPES缓冲液常用于细胞器和极易变性的、对pH敏感的蛋白质和酶的研究工作,以及生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。

Tris缓冲液:三羟甲基氨基甲烷(Tris)为弱碱性,在25°CpKa8.1,其缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0~9.2之间,在生物化学实验中常用的pH值为6.87.48.08.8。常在电泳和凝胶实验中起缓冲作用,并被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还可用于线虫的中间纤维的形成。其衍生的TETAETBE等缓冲液,常用于DNA的稳定、存储以及提取。

HEPES缓冲液的特征:

1pKa值介于6.08.0之间;

2、在水中具有高溶解度;

3、具有膜不透性,不易穿透生物膜;

4 对生化反应影响有限,可耐化学作用和酶解作用,且不与金属离子生成复合物或沉淀;

5、有极低的可见光和紫外光吸收;

6、离子浓度、溶液组成和温度对解离的影响小;

Tris缓冲液的特征

1、本身呈碱性,只用Tris-HCl缓冲体系即可配制pH范围由酸性到碱性的缓冲液,并且可以与其他物质组成多种缓冲体系,如TETBSTAETBE等衍生缓冲液;

2、对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀;

3、受溶液浓度影响大,稀释十倍,pH值变化大于0.1

4、受环境影响较大,一般来说,温度每升高一度,pH值下降0.03;易吸收空气中的CO2

综上所述,HEPESTris缓冲液在缓冲范围、应用领域、以及特征都有一定的差别,在具体实验中,需要对实验条件进行仔细分析,以选择最合适的缓冲体系。德晟科技目前生产研发的HEPESTris缓冲剂,原料充足,发货速度快,纯度≥99%,可用于低温生化研究以及作为各种诊断试剂盒的原材料,一流的研发设备,专业的科研团队,将为客户提供一流的品质服务与保障。

 

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Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常见的生物缓冲液,可用于整个DNA提取过程。从多种来源提取过程中,DNA对pH敏感。在细胞裂解,去除不需要的细胞成分和沉淀过程中,可以使用tris来维持稳定的pH值。另外,它在细胞裂解中也起到特别重要的作用。
生物缓冲剂是电泳技术的重要组成部分,一般将其添加到溶液当中,以在电流通过样品时使pH稳定。此外,缓冲剂还能提供电泳迁移时所需的离子。
谷氨酸脱氢酶(简写GDH)是生物体代谢途径中一种重要的酶类。该酶广泛存在于各种高等植物、生物及动物体内,它在生物体内氮、碳代谢过程中起着至关重要的作用

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