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吖啶酯离去基团性能影响

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吖啶酯离去基团性能影响

2020/03/05 17:05
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化学发光检测时被测物质自身发光,无需其它光源,背景噪音较小,灵敏度高,在复杂体系和生物样品中检测灵敏度极高。使用的化学发光试剂有鲁米诺衍生物、吖啶酯衍生物、过氧草酸酯衍生物和1,2-二氧杂环丁烷等,其中吖啶酯类光量子产率较高。

吖啶酯类化学发光试剂不像鲁米诺衍生物,鲁米诺类需要配合催化剂和强化剂,会导致背景强化,本底升高从而限制了灵敏度;吖啶酯类发光剂光量子产率高,背景低,且与蛋白、抗原、抗体等偶合后,发光效率几乎无影响。吖啶酯化学发光试剂可分为两类:吖啶酯和吖啶磺酰胺。

吖啶酯

吖啶磺酰胺

吖啶类化学发光反应机理基本成熟,吖啶酯或者吖啶磺酰胺首先9位碳原子与过氧化氢加成,碱性条件下生成过氧负离子,分子内进攻羰基,离去基团离去后生成不稳定中间体,然后开环生成吖啶酮并释放光子。

当离去基团上连有给电子基团时(如CH3),能起到提高空间位阻的同时降低羰基亲电性,增加该化合物水解稳定性,从而保证了光量子产率,信噪比高。此类产品公司有DMAE-NHS,NSP-DMAE-NHS,NSP-DMAE-HEG-GLU-NHSNSP-SA-NHS等吖啶类化学发光。

当离去基团上连有强吸电子基团(如F),羰基亲电性提高,反映加快,发光速率加快,但与此同时自身水解稳定性降低过大,光量子产率降低。当离去基团时弱吸电子基团(如Br),总体分子稳定性较好,光量子产率较高。

通常用吖啶NH来与蛋白质抗体上的伯氨基偶联直接进行标体,如DMAE-NHSMe-DMAE-NHSNSP-DMAE-NHSNSP-SA-NHS等。标记缓冲液可用pH10.1的碳酸缓冲液;纯化缓冲液可用pH6.3PB,含0.9氯化钠;封闭缓冲液用pH7.4PB,含0.9氯化钠、1%BSA0.04叠氮钠。

德晟主要研发生产吖啶酯系列,产品本底低发光效率高,纯度好,批间差异小,吖啶酯产品质量有保证!

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