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电泳缓冲液TAE和TBE的作用

2020/02/24 17:05
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电泳缓冲液的作用

缓冲液电泳时的作用是维持合适的PH值,电泳正极和负极都会发生电解反应,电流通过水(H2O)时,在正极发生氧化反应,生成氧气以及氢离子;在负极发生还原反应,生成氢气以及氢氧根离子。长时间电泳将会使正极变酸,负极变碱。一个好的缓冲系统应该有较强的缓冲能力,使溶液两极的pH保持基本稳定。

电泳缓冲液的另一个作用是使溶液带有一定的导电性,以利于DNA分子的迁移。 DNA为碱性物质,在电泳(缓冲液pH=8)时带负电荷,由负极向正极迁移。

两种常用的电泳缓冲液TAE和TBE

TAE是使用较为广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量),且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种(TBE和TPE)缓冲液快约10%,电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得较好的分离效果,此外,回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。TAE的缺点是缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换

TBE的特点是缓冲能力强,长时间电泳时可选用TBE,并且当用于电泳小于1kb的片段时分离效果较好。TBE用于琼脂糖凝胶时易造成高电渗作用,并且因与琼脂糖相互作用生成非共价结合的四羟基硼酸盐复合物而使DNA片段的回收率降低,所以不宜在回收电泳中使用。

所以我们在做DNA电泳时用哪种缓冲液体系其实取决于实验目的,总结来说,TAE的特点是缓冲容量小,但是溶解度大,易于储存。TBE的特点是缓冲容量大,但是溶解度小,不易长期储存,易产生沉淀。

德晟在生物缓冲液领域已经有十几年的生产研发经验,目前合作的企业也非常多,正是因为公司的产品质量好,稳定性强,灵敏度高,价格优惠,所以受到了客户的广泛认可,回购率也高达90%,相信德晟会越来越强大,热烈欢迎各大企业来我公司考察参观。

 

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1.从外观上,优质的卡波姆应为白色松散粉末,或稍带有淡黄色,如果颜色较深,则说明产品不够纯净含有色杂质
从外观上,优质的卡波姆应为白色松散粉末,或稍带有淡黄色,如果颜色较深,则说明产品不够纯净含有色杂质。

2. 从手感上,卡波姆940应是比较轻、比较松散的,由于其分子是高度聚合的长链,分子间比较松散,如果产品粉末相对紧实,则说明丙烯酸聚合反应控制不佳,聚合度不均匀或者分子大小不一等等;这样产品应用时耐剪切性、凝胶透明度、增稠性就相对差一些。

3. 从气味上,由于卡波姆本身是聚丙烯酸或聚羧基乙烯,含有酸性基团羧基,聚合物也不易挥发,有微弱的酸性气味;如果味道较重或者有其它气味,则可能是生产干燥过程中溶剂有残留。

4. 从凝胶透明度上,用水或乙醇溶解后,形成的凝胶应该透明清亮,而且凝胶均匀,如果凝胶浑浊透光性差则会严重影响使用。
1.卡波姆980与940相比,聚合物的分子更大,在不同浓度、温度、pH值等条件下,各自的粘度变化和流变性变化表现也不一样,各自耐离子性和耐剪切性也有差异。
2. 卡波姆980在应力的动态震荡下表现出了弹性,940则差一些但更易于涂抹均匀。

3.当离子存在或浓度增加时,980与940透明度影响都很小,但980耐离子性比940更高,所以能离子增加时980能提供相对更高的粘度及屈服值。
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