一种你不可不知的体外诊断试剂-MAOS

发布时间:

2020-04-14


标签:体外诊断试剂,MAOS,显色试剂

作为一种新型Trinder's试剂,MAOS在其中占有举足轻重的地位,它是一种易溶于水的白色粉末,中文名称:N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲基苯胺钠盐一水合物,对光线敏感,对湿度敏感,CAS号:82692-97-5,纯度要求>99%,分子结构如下图所示:

 MAOS结构

MAOS的应用 

 新型Trinder's试剂是高水溶性苯胺衍生物,被广泛用于诊断检测和生化试验。在比色法测定过氧化氢活性中比常规生色的试剂具有若干优势。新型Trinder's试剂足够稳定,既可以用于溶液也可以用于试验流水线检测系统中。在过氧化氢和过氧化物酶的存在下,新型Trinder's试剂在与4-氨基安替比林 (4-AA) 或3-甲基苯并噻唑砜腙(MBTH) 的氧化偶合反应过程中,形成非常稳定的紫色或蓝色染料。与MBTH偶合染料的摩尔吸光度比与4-AA偶合染料的高1.5-2倍;然而,4-AA溶液比MBTH溶液更稳定。底物被其氧化酶酶促氧化产生过氧化氢。该过氧化氢的浓度对应于底物浓度。因此,可通过氧化偶合反应的显色测定底物的量。葡萄糖、酒精、酰基-辅酶A和胆固醇可以用于检测与新型Trinder's试剂及4-AA偶合的那些底物。现有10种新型Trinder's试剂,MAOS一员的运用也非常重要,对于特定的底物,试验不同种类的新型Trinder's试剂对开发较好的检测系统是必需的。MAOS是一种氧化性色原试剂,高水溶性,稳定的苯胺类似物,生色过程和氧化反应的pH范围很广

 

MAOS检测溶液的制备——(其他底物配置方法基本一致)

1. 用 10 ml PBS 溶解 20 mg MAOS 以制备 6.6 mM  MAOS溶液。(具体溶度根据需要调节)

2. 用 10 ml PBS 溶解 14 mg 4-氨基安替比林(4-AA)以制备 6.6 mM 4-AA 溶液。

3. 用 PBS 制备 2 U/ml 辣根过氧化物酶溶液。

4. 将等体积的各溶液混合以制备检测溶液。4℃下避光储存检测溶液

 MAOS成品

MAOS检测步骤

1. 为酶促氧化反应制备样品溶液。缓冲液的 pH 值范围应为 5.5-9.5。

2. 使用相同缓冲液制备含有已知量的底物的标准溶液。

3. 向样品溶液中加入合适单位的氧化酶,接着加入等体积的检测溶液。

4. 室温或 37℃下孵育该混合物 30 分钟到 1 小时。

5. 测定 555 nm 处的 O.D.值。

6. 制备标准曲线,并测定样品溶液中的底物浓度

 

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