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Hanks病毒保存液操作注意事项

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Hanks病毒保存液操作注意事项

2020/06/04 13:30
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Hanks病毒保存液的操作步骤:

(一)准确称量试剂:根据不同菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤到透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。

                           

Hanks病毒保存液

 

 

注意事项:

1、Hanks氏病毒保存液标本宜在新鲜时检验。如有细菌污染,菌体可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在ELISA中可使本底加深。

2、冻结标本溶解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混合,不要在混匀器上强烈震荡。

3、浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检验。反复冻融会使蛋白效价降低,所以待测样本如需保存作多次检验,宜少量分装冰存。ELISA实验标准曲线平直,一般有一下原因:标准曲线制备是否不当,洗孔部充分,读数不准确或是有吸量误差。查找原因,即可找到相应解决方案。

 

保存条件:

培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在2~6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,现在均改制成粉末。

德晟自主研发生产的Hanks病毒保存液已成功上市,欢迎有需求的广大客户进行详询。

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