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Tris缓冲液与磷酸盐缓冲液的区别

2020/06/10 13:30
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缓冲液是一类具有维持反应体系pH的物质,通常是由弱酸、弱碱及其盐或者两性物质组成,比如光合作用中的CO2、人体血浆中的碳酸氢盐等都是具有缓冲能力的物质,是细胞代谢反应必备的。在生化检验领域,常用的就是Tris缓冲液和磷酸盐缓冲液,这两者又有一定的区别。

一、缓冲范围

Tris缓冲液的缓冲范围5.0-9.2之间,根据Tris搭配不同的酸有差异

在生物化学试验中常用的pH有6.8、7.4、8.0/8.8。Tris缓冲液在生物化学研究中使用的越来越多,有超过磷酸盐缓冲液的趋势,如在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中已都使用Tris缓冲液,而很少再用磷酸盐。

磷酸盐PBS缓冲液的缓冲范围1-12之间,根据不同磷酸酸式盐比例调整

磷酸盐是传统生物化学使用广泛的一种缓冲剂,磷酸有两种酸式盐,它们是二级解离,有两个解离常数,因此它们配制成的缓冲液pH范围很宽。通常钾盐比钠盐好,溶解度高,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液不能用钾盐,SDS的钾盐会沉淀。

二、应用领域

生物缓冲液Tris是一种氨基丁三醇独一不含钠的氨基缓冲碱,不会给体系中带入钠、钾离子,不影响渗透压,必要时也可以加入生理盐水调节盐平衡。其对生物化学过程的影响很小,也不会与钙、酶及重金属离子生成沉淀,不影响激酶、磷酸酶、脱氢酶等多种酶的活性。通常用于DNA、RNA及蛋白质相关的实验,常用缓冲体系有:Tris-HCl缓冲液、TBS缓冲液、TE缓冲液、TAE缓冲液、TBE缓冲液、Tris甘氨酸缓冲液、Tris磷酸缓冲液等。需要注意的是Tris的pH值受温度影响较大,要注意控制好温度;Tris溶液显碱性,会吸收CO2,要注意密封。

磷酸盐缓冲液虽然缓冲范围较宽,但pH7.5以上的缓冲能力较小,Tris本身呈碱性则要好一些,磷酸盐本身能解离出阳离子,具有盐平衡的作用,不会破会生物蛋白的结构和生物特性,磷酸盐PBS缓冲液通常用于细胞实验。但是与钙、镁离子及重金属离子生成沉淀,同时也会抑制某些酶的活性。

现在,Tris缓冲液的应用越来越多,有超过磷酸盐缓冲液的趋势,德晟科技也是侧重发展Tris缓冲液相关的应用,不过还是建议大家根据实验的试剂需求来选择合适的生物缓冲剂。

 

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