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显色底物DAOS在低密度脂蛋白检测中的应用

2020/06/16 13:30
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显色底物DAOS是一种含有苯胺基的磺酸钠衍生物,CAS号:83777-30-4,属于一种很灵敏的显色试剂,在临床检测中被广泛的用于各种生化试剂盒,这里以其在血脂检测系列的低密度脂蛋白检测中的应用作简单介绍。

在血液中,胆固醇通常是与载脂蛋白结合成复合物的脂蛋白的形式,分为四种:高密度脂蛋白HDL、低密度脂蛋白LDL、极低密度脂蛋白VLDL和乳糜微粒,其中LDL参与将胆固醇运送至外周细胞,而HDL负责从细胞中吸收胆固醇。目前检测低密度脂蛋白主要是先检测出总胆固醇含量和高密度脂蛋白的含量及甘油三酯含量来计算LDL浓度。LDL-C=TC-HDL-C-TG/2.2(以mmol/L计),(2)LDL-C=TC-HDL-C-TG/5(以mg/dl计)。

DAOS试剂粉末

检测总胆固醇时,先通过胆固醇酯酶CHE将胆固醇酯水解成胆固醇和脂肪酸,再用胆固醇氧化酶将其催化氧化成4-胆甾烯酮并生成过氧化氢,然后就是通过显色试剂DAOS和4-AAP偶联,与过氧化氢在POD催化下产生显色反应,通过测定吸光度就可以测定出总胆固醇的浓度。

检测甘油三酯时,甘油三酯在脂蛋白酯酶(LPL)存在下线水解成甘油和脂肪酸;甘油和ATP在甘油激酶(GK)催化下生成甘油-3-磷酸和ADP;甘油-3-磷酸和氧在甘油-3-磷酸氧化酶(GPO)催化下生成二羟丙酮磷酸和过氧化氢,之后就与上面步骤一样用显色底物与4-APP偶联与过氧化氢产生显色反应,测出TG浓度。

检测高密度脂蛋白时,采用双试剂形式反应,试剂一中含有聚阴离子和表面活性剂,选择性与VLDL、LDL结合,并抑制试剂二中COD,CEH对VLDH-CH、LDH-CH起作用,从而选择性作用于HDL-CH,通过CEH-COD-POD作用,再通过测量吸光度测定出HDL的浓度,之后通过计算便可得出LDL浓度。

总而言之,显色试剂DAOS主要是通过与待测指标在一系列酶催化反应后生成的过氧化氢产生显色反应,来达到测定的目的,除此之外有些公司试剂盒用的是ESPAS及ADPS来作为显色底物,德晟搜研发的这个系列还有其它的显色底物,根据特性可用于不同的生化检测。

 

 

 

 

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