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Tris缓冲液CAS77-86-1的溶液配置方法

2020/06/23 13:30
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三羟甲基氨基甲烷Tris,即氨丁三醇,也叫缓血酸胺,是一种含氨基的三元醇,本身具有弱碱性,通常搭配弱酸作为生物缓冲剂,被广泛用于生物化学和分子生物学中的生化检测和试剂盒中。

Tris理化性质:

  英文名 Trometamol

中文名: 三羟甲基氨基甲烷

  分子量: 121.135

分子式: (HOCH2)3CNH2 

外观: 白色晶体粉末

溶解性:溶于水和乙醇,微溶于乙酸乙酯、苯,不溶于乙醚、四氯化碳。

pKa:室温下为8.1,水溶液pH10.5

缓冲范围:7.0-9.2

Tris缓冲液通常被用作核酸和蛋白质的溶剂,由于生物缓冲剂Tris的2号位碳原子连有氨基,水溶液呈碱性,DNA溶解于此溶液时会被去质子化,从而提高溶解性。作为缓冲剂时,Tris通常需要搭配弱酸使用,比如搭配盐酸使用或者直接做成Tris-HCl盐。除了搭配比较多的HCl外,还经常与醋酸、硼酸搭配使用,以及电泳缓冲液中搭配甘氨酸使用。

生物缓冲剂

Tris-HCl缓冲液:

根据Tris分子量称取所需质量(常用浓度1-2M),配成水溶液,然后缓慢加入浓盐酸,调节到所需pH值。注意配成溶液显碱性时,会吸收空气中酸性气体CO2,需要将瓶盖盖严;调节pH时需要将溶液冷却到室温,其溶液对温度敏感,每升高1度,pH值下降0.03,否则调节好pH后冷却到室温会发生变动。

TE缓冲液:

Tris-EDTA buffer,常用于分子生物学试剂,溶解DNA。常用浓度10-100mM,EDTA 摩尔浓度为其十分之一,盐酸调节pH到所需值。

TAE缓冲液:即Tris \Acetate\EDTA,这里用醋酸来取代盐酸的作用。

TBE缓冲液:Tris+Borate+EDTA ,调节pH用硼酸代替盐酸。

Tris-Gly缓冲液:调节pH用甘氨酸来代替盐酸。

TBS缓冲液:溶液中除了加入Tris base之外,还需加入盐NaCl和少量KCL,用浓盐酸调节pH.

TBST缓冲液:TBS里加入0.1%吐温20(Tween 20)即可。

除了被用作DNA、蛋白质的溶解缓冲液、电泳缓冲液、SDS-PAGE凝胶电泳外,Tris还能作为缓血酸胺在体液中与碳酸起反应,生成碳酸氢根,摄取氢离子而纠正酸血症,作用较强,且能透过细胞膜。德晟生产的Tris主要用于生物缓冲剂以及大批量出口用于进一步精制等。

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