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病毒灭活保存液的作用及制作方法

2020/06/25 13:30
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由于新冠疫情的原因,我们每个人从工作到生活都受到了巨大的影响,生物病毒和核酸检测也从进入大众视野到人尽皆知,相应的病毒采样和病毒保存液也变成了市场上需求量非常大的一种生物试剂原料,当然也有很多人好奇这是怎么制作的。

病毒保存液根据作用的不同,有灭活型和非灭活型两种,制作方法当然也不一样,本文详细介绍灭活型病毒保存液。灭活型和非灭活型明显的区别就是,灭活型不需要保持病毒结构的完整性,只需要释放其核酸,然后通过核酸的NT-PCR及探针测试等核酸检测步骤就可以检测出病毒样本的是否具有特征核酸,也就可以判断采样对象的病毒检测是否为阳性、是否被感染。生物病毒是一种由核酸DNA或者RNA蛋白质组成的结构简单的微生物,样本含有病毒特征核酸,则可以判断样本被病毒感染。

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由于是灭活病毒而不用培养病毒,首先需要的就是对病毒进行裂解失活、破坏其膜蛋白释放核酸,通常制备的病毒保存液里加有裂解盐。不同公司用的裂解盐可能不一样、有盐酸胍、异硫氰酸胍等,本质作用一样,都是裂解病毒膜蛋白,提取出被包裹的病毒核酸。采样时通常不能立即进行核酸检测,释放出的核酸会与空气中的RNA酶接触被降解,因此保存液中需要加入RNA酶抑制剂,抑制其催化RNA的降解。另外,还需要加入Tris缓冲剂和EDTA来维持核酸所处环境的pH值,利用EDTA的特性络合钙、镁、铁等金属离子,防止金属离子激活蛋白酶,减少对核酸质量的影响,提高核酸的稳定性,延长保存时间。

配置病毒保存液时用去离子水即可,有特殊试验要求的可以用超纯水。配置跟我们平常配置生物缓冲液差不多,不过对温度的要求更严格一点,在保存和运输的时候也要保持低温。病毒保存液涉及病毒采样和核酸检测,是必须要严谨对待的,配置好后需要对其进行病毒灭活测试和阳性样本检出率的测试。

病毒保存液的制作看上去简单,对于实际生产来说却是不容马虎的,既要保证病毒灭活失去感染性,又要抑制RNA酶降解核酸,有一个过程没做好都会影响到检测。德晟公司组织科研人员查阅资料、请教专家、反复实验、多方验证,才成功研发出针对新冠病毒的病毒保存液。

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核酸释放剂可以裂解细胞或病毒蛋白质外壳,将其中的核酸释放出来,再通过PCR实验进行核酸检测。它有不同的类型,其中灭活型病毒保存液是新冠检测中应用普遍的一种核酸释放剂。
从目前来看,新型冠状病毒感染人类后分为两种情况,一种为新型冠状病毒肺炎感染者,这种情况较为常见。而另外一种则为无症状感染者

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