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CAS82692-97-5显色试剂MAOS与TMB的区别

2020/07/01 13:30
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显色底物MAOS试剂是生化试剂盒里常用的一种高灵敏度显色试剂,全称N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲基苯胺钠盐一水合物TMB也是一种常用的显色试剂,两者的显色原理类似,但又有一些区别。

MAOS试剂属于一种新型的Trinders试剂,在过氧化氢和过氧化物酶POD的存在下,与4-氨基安替比林(4-AAP)形成稳定的橙色或红色醌类物质,也可以与3-甲基苯并噻唑砜腙(MBTH) 的氧化偶合形成稳定的紫色或蓝色染料,与MBTH偶合染料的摩尔吸光度比与4-AA偶合染料的高1.5-2倍;然而,4-AAP溶液比MBTH溶液更稳定,因而Trinders试剂更多的是与4-AAP搭配使用。

显色底物MAOS试剂

TMB试剂:是应用于ELISA试剂盒里的显色底物,TMB或TMBZ在辣根过氧化物酶的催化下被过氧化氢氧化呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,抗原浓度与OD值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中抗原的浓度。它无需像色原ADPS、TOOS、MAOS等这些,需要引入另一种化合物(如4-AA,MBTH)来做颜色反应,但TMBZ需要在酸性条件(HCl)下作颜色反应,有的生化检测在中性条件下检测更准确,有些酶的催化性能对pH很敏感,需要维持中性的环境保持活性,这一点限制了TMB的应用。

MAOS与其它Trinder试剂一样都是高水溶性苯胺钠盐,与4-aap偶联反应时,苯胺的N变成C=N双键,对位上与4-AA的氨基结合成C=N双键,从而构成一种醌亚胺结构,跟对苯醌的C=O双键类似,吸收波长都在可见光区域,从而产生显色反应。MAOS氧化后的产物吸收波长远远超过普通的显色试剂,它的产物紫外吸收波长有630nm是相当高的。如果使用像MAOS这样,产物吸收波长在紫外光区,且比较高,则可以大大减少样本中吸收波长与检测波长相近的物质的干扰。因此针对一些需要高度精确值的生化检测项目,就推荐使用MAOS作为显色底物。

总而言之,MAOSTMB的区别是显色产物吸收波长远高于TMB,偶联需要引入4-AAPMBTH,可以在中性pH环境下完成检测。德晟目前生产的有包括MAOS在内的9新型Trinders试剂

 

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