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Good's 缓冲液中的双胞胎-PIPES和HEPES

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Good's 缓冲液中的双胞胎-PIPES和HEPES

2020/07/21 13:30
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近段时间总是会接到客户询问Good's 缓冲液的询单,但是很多次就连客户自己也不是能很准确的表达自己确切想要的产品。因为比竟能真正懂的人还是少数,今天我就简单的介绍下Good's 缓冲液以及Good's 缓冲液中PIPESHEPES之间的同于不同。

 

Good's 缓冲液

 

Good's 缓冲液又称为两性离子缓冲液是一类专用于生命科学研究的缓冲体系,其不参加和不干扰生物化学反应过程,对酶化学反应等无抑制作用,所以它们专门用于细胞器和极易变性的、对pH敏感的蛋白质和酶的研究工作。这些缓冲体系应具有以下特性:

    1、pKa值在6-8之间;  

    2、在水中的溶解度高;   

    3、不易穿透生物膜;

    4、盐效应小;

    5、离子浓度、溶液组成和温度对解离的影响小;

    6、不与金属离子生成复合物或沉淀;

    7、该缓冲剂化学稳定;

    8、紫外和可见光波长范围内光吸收小;

9、易制得高纯度的盐。

Good's 缓冲液中的PIPESHEPES是我们常用的缓冲剂,它们之间有着千丝万缕的关系。在某种程度上有着相识的作用,但也有着它们各自的功能和优势,在我们了解了Good's 缓冲液后再来了解一下PIPESHEPES,让我们慢慢渗透到它们各自的领域,以便我们能更好的选择使用发挥它们各自的特点:

PIPES

pH缓冲范围是6.1-7.5,不溶于水,溶于NaOH水溶液。PIPES不同于含二(2-羟乙基)氨基基团的缓冲剂(如Bis-trisBicine),与多数金属离子不能形成稳定配合物,适用于含有金属离子的溶液体系中的缓冲剂。根据已有的研究结果,PIPES可被应用于使用磷酸纤维素色谱纯化微管蛋白,用于凝胶过滤法纯化重组GTP结合蛋白ARF1ARF2,作为缓冲液从大肠杆菌中结晶转酮酶。另外,由于PIPES能形成自由基,因此不适合应用于氧化还原体系。在阳离子交换色谱法,应当使用低浓度的PIPES缓冲液,这是因为PIPES具有相对较大的离子强度,而且其pKa值具有浓度依赖性。 

HEPES

pH缓冲范围是6.8-8.2,溶于水,它是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L,一般培养液内含20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。 不与金属离子形成稳定的配合物,多数情况下,不会干扰生物化学过程,HEPES常用于各种类型生物体的细胞培养基中;在蛋白质研究中,PIPES常用作阳离子交换色谱法中结合缓冲液的组分和洗脱液;分离与分析RNA核组分的反应缓冲液、预杂交缓冲液、杂交缓冲液;用于RNA与T4RNA连接酶的3′-终端标记;用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。DNA研究中,PIPES用作磷酸钙和DNA沉淀物形成体系的缓冲液,AFM以及电穿孔实验中的缓冲液。另外,HEPES对DNA和限制酶之间的反应有一定干扰,也不适合用于Lowry氏法测定蛋白质含量。

由此可见,PIPES和HEPES都不能和金属离子形成稳定的配合物,适合于含有金属离子的溶液体系。但它们之间也具有一定的差异性,溶解性方面,PIPES不溶于水,而HEPES具有良好的水溶性;缓冲范围方面,PIPES偏酸性到中性,HEPES偏中性到碱性,这些同和不同都告诉我们,要想更好的选择它们,首先就要了解它们。德晟在Good's 缓冲液中已经有着丰富的经验。它提供给您的是技术+产品,教您如何去正确的选择分辨您所需要的。这样的公司你为何不选呢!

 

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