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哌嗪-1,4-二乙磺酸PIPES使用须知

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哌嗪-1,4-二乙磺酸PIPES使用须知

2020/07/28 13:30
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哌嗪-1,4-二乙磺酸PIPESCAS号5625-37-6,是一种应用广泛的生化试剂,外观呈白色粉末,本身具有弱酸性,通常溶解在NAOH水溶液中制成生物缓冲液,缓冲范围是6.1-7.5,适用于中性偏弱酸性缓冲体系。

PIPES缓冲液配置:

PIPES与其它缓冲剂不同,配置时不是先直接溶于水,而是先配置氢氧化钠水溶液,然后根据PIPES分子量302.368称量粉末,直接溶于NaOH水溶液,再用浓度更低一点的NaOH溶液来调节缓冲液的pH值。以下是浓度为0.1M的PIPES缓冲液参考配置方法,温度保持在20℃。

A.配0.1M溶液(A)

(ⅰ)NaOH/去离子水=4g/400ml …①

(ⅱ)「①+PIPES 30.237g」…②

(ⅲ)②+去离子水(约600ml)=1,000ml

B.配0.1M NaOH溶液(B):NaOH 4g/去离子水 1,000ml

C.pH 5.6 1,000ml(A)+0ml(B)      (A):(B)=5:0

    pH 6.4 1,000ml(A)+200ml(B)   (A):(B)=5:1

    pH 6.8 1,000ml(A)+400ml(B)   (A):(B)=5:2

    pH 7.2 1,000ml(A)+600ml(B)   (A):(B)=5:3

    pH 7.7 1,000ml(A)+800ml(B)   (A):(B)=5:4

PIPES缓冲剂和磷酸盐缓冲剂的不同点:

通常在生化实验中使用较多的生物缓冲剂是磷酸盐缓冲液,磷酸是三元酸由於它们是二级解离,有两个pKa值,所以磷酸盐容易配置成各种浓度的缓冲液,适用的pH范围宽,pH受温度影响的影响小,稀释后pH变化小,稀释十倍后pH的变化小于0.1。但是,在在有金属离子的溶液体系中,磷酸体系会与常见的Ca离子、Mg离子以及重金属离子缔合生成沉淀。

PIPES则不一样,不像Bicine、Bis-Tris具有配位基团,与钙、镁离子等大多数金属离子不能形成配合物,而在生化反应中很多蛋白和酶制剂活性受金属离子影响,这时候就不能使用磷酸盐缓冲液,相反PIPES就比较适合含有金属离子的溶液体系中的缓冲剂。不过PIPES能形成自由基,不适用于氧化还原体系的缓冲液。

在选择生物缓冲剂时,不仅要考虑的缓冲范围,还要考虑实验体系的适合性和限制条件,虽然磷酸盐缓冲性能很好,但某些条件就需要使用PIPES。德晟公司是一家专门生产各种类型生物缓冲剂的厂家,有相关的需求都可以直接咨询!

 

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