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生物缓冲剂TAPS(CAS29915-38-6)使用指南

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生物缓冲剂TAPS(CAS29915-38-6)使用指南

2020/07/29 13:30
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三羟甲基甲基氨基丙磺酸TAPS,是一种常用的生物缓冲剂,通常由三羟甲基氨基甲烷Tris和1,3-丙磺酸内酯合成,缓冲范围7.7-9.1,可以看成弱碱性Tris与丙磺酸组成的缓冲体系,不需添加用盐酸或者其它酸。本文介绍其使用方法。

TAPS的称量:

TAPS的相对分子质量可以通过分子式C7H17NO6S计算或者直接查询得知为243.28,根据需要配置溶液的量和摩尔浓度,准确计算出需要称量的质量,用分析天平准确称量。还要注意下所购买试剂的纯度,修正称量的误差,避免含量低造成称量的量不足。

TAPS缓冲剂粉末

 

TAPS的溶解和定容:

将称量好的TAPS试剂粉末用去离子水完全溶解,注意溶解时一开始不要加太多水,保证全部溶解即可,然后继续加水定容。定容时需要注意温度,因溶解时放热或吸热导致温度变化太大,则应等温度接近室温时定容。配置好后将容量瓶密封好盖子,可以留着随时备用,标记好TAPS溶液A,可标记好浓度配置日期等信息。

NaOH碱液配置:

与TAPS一样,根据所需的量准确称量NaOH的质量,然后用去离子水溶解,在室温下定容,做好标记,为溶液B。

TAPS缓冲液配置:

根据所需要的生物缓冲液pH值,将上述溶液A和溶液B按一定比例混合,即可得到所需的TAPS缓冲溶液。如果需要特定pH值的缓冲液,可以再按比例配好近似浓度缓冲液后,再通过pH计测量具体pH值,调整溶液A、B的比例,从而调整成所需的pH值。注意温度控制在室温,不能用NaOH时,碱液可用KOH代替。

pH 4.6  1,000ml(A)+0ml(B)      (A):(B)=5:0

pH 7.8  1,000ml(A)+200ml(B)   (A):(B)=5:1

pH 8.3  1,000ml(A)+400ml(B)   (A):(B)=5:2

pH 8.6  1,000ml(A)+600ml(B)   (A):(B)=5:3

 pH 9.0  1,000ml(A)+800ml(B)   (A):(B)=5:4

除了常规的TAPS缓冲液,还有一些其它的,比如10X Tris-TAPS-EDTA 缓冲液,组份包含500 mM Tris; 500 mM TAPS; 10 mMEDTA,TAPS可以配合Tris使用,这时候Tris不需要加其它酸(盐酸、醋酸、磷酸等),TAPS本身也相当于Tris+丙磺酸了。

TAPS的缓冲液配置时比较简单的,大家直接买试剂粉末,然后自己配置成缓冲溶液比去直接买其实要方便很多,毕竟急用时直接配置比快递要快,而且省钱,需要时现配现用,也避免了浪费。德晟有专门生产的Tris、TAPS等缓冲剂,也可以提供配置好的急用型缓冲液。

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Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常见的生物缓冲液,可用于整个DNA提取过程。从多种来源提取过程中,DNA对pH敏感。在细胞裂解,去除不需要的细胞成分和沉淀过程中,可以使用tris来维持稳定的pH值。另外,它在细胞裂解中也起到特别重要的作用。
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