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疫情期间不断成长的病毒保存液厂家

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疫情期间不断成长的病毒保存液厂家

2020/08/12 13:30
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现在一提到新冠肺炎人们首先想到的就是口罩,受疫情影响出门戴口罩成了人之常态。为了让这种现象消失,国民生活尽快恢复正常,核酸检测成为确诊新冠病毒主要检测方法,而核酸检测的核心原料则是病毒保存液

病毒保存液产品图(左:非灭活型 右:非灭活型)

当前,新型冠状病毒防控形势仍然十分严峻,作为核酸检测的第一步,样本采集与保存的重要性毋庸置疑,检验业内常说“garbage in, garbage out(垃圾标本出垃圾结果)”,最重要的影响因素首先是样品采集。如果样本采集出了问题,那么后面的各项工作做得再好,其结果也是无效的。目前国内有数百家病毒采集管厂商,很多都宣称“非胍盐”“灭活”保存液,它们的实际效果如何?真正能达到灭活病毒吗?能真正保存病毒RNA不降解吗?

核酸检测对于广大商家而言无疑是个大商机,有的厂商趁这热度不管产品质量是否过关就提供给客户,导致产品种类很多合格的却很少,所以为什么“假阴性”出现的现象越来越多。德晟在病毒保存液上投入了大量的时间、人力和物资,保证产品质量无误才推出,虽然没有抢占市场热度,但还好获得了客户的认可,合作的客户达到100+,康为世纪也是其中之一。下面对德晟提供的保存液和其他病毒保存液做了一个实验对比。

不同病毒保存液对禽类冠状病毒灭活效果的研究:

A、实验材料:SPF鸡胚购自济南斯帕法斯,并自行孵化至10日龄。鸡传染性支气管炎病毒采用 IBV QXL87株种毒。实验所用稀释液:生理盐水(0.9% NaCl)高压灭菌,并保存于4℃冰箱。

B、实验对象:1号保存液(康为世纪灭活保存液)、2号保存液(国家指导的非灭活型病毒保存液)、3号保存液(A公司灭活保存液)、4号保存液(康为世纪非灭活型病毒保存液)。

C、实验内容:分为两部分

1.1.不同病毒保存液灭活效果的鸡胚感染比较

将制备好的鸡传染性支气管炎病毒 QXL87株种毒添加至保存液中,按1(病毒原液):10(保存液) 比例,置室温18-26℃灭活45min;将灭活好的病毒液接种SPF鸡胚进行灭活检验,同时对收获尿囊液进行鸡传染性支气管炎病毒核酸检测,参照GB/T 23197-2008 鸡传染性支气管炎诊断技术,使用康为世纪RNA提取试剂盒提取RNA,并使用禽源冠状病毒核酸检测试剂盒(PCR荧光探针法)检测。具体见下表。

1.2不同病毒保存液灭活效果的验证研究

根据1.1研究结果,选择合适的病毒保存液对病毒进行灭活,按兽药典要求进行灭活检验。将灭活好样品按尿囊腔接种方式接种10日龄SPF鸡胚,每个样品接种10枚鸡胚,0.1 mL/枚,置于37℃培养箱中培养144 h,弃去24 h死亡的鸡胚,观察记录24-144 h鸡胚死亡情况和接种后有病变的活胚数的数量。观察鸡胚病变,同时收获尿囊液进行PCR检测,即为第一代接种核酸检测结果。然后将第一次收获的四个尿囊液进行二次鸡胚接种,培养144h后收获尿囊液进行PCR检测,即为第二代接种核酸检测结果。

D、实验结果和讨论

图注:No1:康为世纪灭活保存液;No2:国家指导的非灭活型病毒保存液;No3:A公司灭活保存液;No4:康为世纪非灭活型病毒保存液

第一代收获的尿囊液进行IBV核酸检测。结果发现康为世纪灭活型病毒保存液对病毒消杀非常彻底,几乎检测不到。

图注:No2-1:康为世纪灭活保存液;No2-2:国家指导的非灭活型病毒保存液;No2-3:A公司灭活保存液;No2-4:康为世纪非灭活型病毒保存液

 

将第一代处理后含病毒样本进行盲传,检测第二代收获的尿囊液的IBV核酸水平,结果发现只有康为灭活型病毒保存液盲传一代能完全抑制病毒的繁殖。

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