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化学发光法与酶联免疫法之间的对决

2020/08/25 13:30
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化学发光法基本原理:是利用化学发光测定化学发光试剂的反应物、催化剂、增敏剂、抑制剂,偶合反应中的反应物、催化剂、增敏剂的方法。

酶联免疫法基本原理:①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据颜色反应的深浅来进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高,故可极大地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。

化学发光图片

化学发光法的优缺点

优点:其是利用化学反应产生的能量进行激发发光,其具有仪器简单、检测限低、线性范围宽等优点,在化学分析方面应用广泛。与荧光法相比,化学发光法不需要外来的光源,从而减少了光散射,降低了噪音信号的干扰,提高了检测的灵敏度,扩大了线性动态范围。缺点:选择性差,会对一个系列的化合物做出反应,而不是针对单个的某一化合物。另一个缺点是化学发光的发射强度依赖于各种环境因素,在不同的环境体系中,发射强度和时间的曲线有较大的差别,所以必须严格控制外界的各种因素。

酶联免疫法的优缺点

优点:1.酶联免疫吸附实验即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记抗原抗体反应在固相表面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等。2.免疫学检测技术具有检测速度快、费用低廉、仪器简单易携、灵敏度高和选择性强等优点,可用于现场检验。它将酶制剂催化反应的放大作用和抗原抗体亲和反应的高度专一性、特异性相结合,以酶标记的抗原或抗体作为主要试剂进行免疫测试,所以具有很高的灵敏度。

缺点:1.只是诊断的辅助手段,特异性和灵敏性有待提高。2.操作过程有些繁琐,反应需要时间,不能一蹴而就。

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