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德晟科技浅谈蛋白质分离纯化的重要性

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德晟科技浅谈蛋白质分离纯化的重要性

2020/09/03 13:30
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蛋白质的分离纯化在生物化学研究中应用广泛,是一项复杂且技术要求高的工作,蛋白质纯化要利用不同蛋白质间内在的相似性与差异,利用各种蛋白质间的相似性来除去非蛋白物质的污染,利用不同蛋白质的差异如大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性等将目的蛋白质从其他蛋白质中纯化出来。

在蛋白质的分离纯化过程中,纯化填料/介质是决定蛋白质纯化效果好坏的核心,是一种必不可少的工具材料,且纯化填料的成本在整个蛋白质生产成本中占比很大,所以纯化填料在生物制药这块的重要性不言而喻。国内纯化填料产品市场目前主要被进口品牌垄断,当下的国际环境错综复杂,有太多不可控因素,核心原材料太依赖于进口,将严重制约国内企业的发展,只有我们自己掌握核心技术才能实现企业发展的自由。

蛋白质纯化流程

近些年来,国内的生物技术发展迅猛,少数领域甚至达到国际领先水平,纯化领域国内已有不少公司涉足,部分企业的产品性能基本已达到,甚至优于进口知名品牌,下面介绍一下蛋白质纯化几种常规方法。

(1)凝胶过滤层析:凝胶过滤层析利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。

(2)疏水作用层析:疏水作用层析是根据蛋白质表面疏水性的不同,利用蛋白和疏水层析填料疏水表面可逆的相互作用来分离。

(3)离子交换层析:离子交换层析是根据蛋白质在一定pH环境下所带电荷的差异进行分离。

(4)亲和层析:蛋白质亲和层析技术适应于理化性质差异性较小而难分离的蛋白质,亲和层析利用固相填料中的配基与混合生物分子之间亲和能力不同而进行分离。

(5)反向层析。反向作用层析是根据样品分子疏水性的不同而进行分离。

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