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体外诊断中,这些抗凝原理你真的了解吗?

2020/09/16 13:30
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抗凝管是为防止血液凝固,经过抗凝剂处理过的试管,用于医疗,生物实验等方面。医院用于抽血的抗凝管,不同颜色代表不同的用途,并含有不同的抗凝剂,但其中的抗凝原理你都知道吗?

通常常用的抗凝管中的抗凝剂有肝素、乙二胺四乙酸、枸橼酸钠、草酸钠,下面德晟为你详细介绍这些抗凝剂的抗凝原理。

1.肝素

肝素广泛在肺、肝、脾等几乎所有组织和血管周围肥大细胞和嗜碱性粒细胞的颗粒中。肝素可加强抗凝血酶III(AT-Ⅲ)灭活丝氨酸蛋白酶,从而具有阻止凝血酶形成,对抗凝血酶和阻止血小板聚集等多种作用。尽管肝素可以保持红细胞的自然形态,但由于其常可引起白细胞聚集,在染色时产生蓝色背景,因此肝素抗凝的血液标本不适合全血液学一般检查。肝素是红细胞透渗脆性试验理想的抗凝剂。

抗凝机制:

肝素是血液化学成分测定中最好的抗凝剂。其抗凝机制是与抗凝酶Ⅱ一起,在低浓度下抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之间的作用,并能加强抗凝血酶Ⅲ灭活丝氨酸蛋白酶,从而阻止凝血酶形成;还有抑制凝血酶的自我催化及抑制因子X的作用。

肝素的盐类有钠、锂、铵盐。通常用肝素抗凝的剂量是10.0~12.5IU/mL血液。临床常用肝素锂,虽其价格较贵,但抗凝效果较好。某些生化成分在血清和肝素抗凝的血浆中有明显的区别。在凝血过程中由于红细胞的溶解破坏使血清钾的含量比血浆高,由于血浆中含有Fg,其含量比血清高。因此测定钾离子时,要注意血清与血浆之间的差异。

2.乙二胺四乙酸

乙二胺四乙酸(EDTA)有二钠、二钾和三钾盐。均可与钙离子结合成螯合物,从而阻止血液凝固。EDTA盐对红、白细胞形态影响很小,血细胞计数用EDTA二钾作抗凝剂。EDTA-2Na与EDTA-2K对血细胞计数影响均较小,但二钠溶解度明显低于二钾,有时影响抗凝效果。其他抗凝剂不适合于血细胞计数。

抗凝机制:

EDTA是临检工作中最常用和最重要的抗凝剂和试剂之一,其机制是通过与水相中的钙离子形成稳定的螯合物而阻止血液凝固。EDTA的盐类有钾、钠、锂盐,均溶于水,钾盐较钠盐的溶解度大,全血细胞计数最好使用EDTA的钾盐。

EDTA能影响某些酶的活性和抑制红斑狼疮因子,故不适于制作组化染色和检查红斑狼疮细胞的血涂片。EDTA还会影响血小板聚集和白细胞吞噬功能,也不适于做止血学检验和血小板功能检验。

3.枸橼酸钠:

枸橼酸盐可与血中钙离子形成可溶性螯合物,从而阻止血液凝固。枸橼酸钠有Na3C6H5O7·2H2O和Na3C6H5O7·5.5H2O等多种晶体。通常用前者配成109mmol/l(32g/l)水溶液(也有用106mmol/l浓度),与血液按1:9或1:4比例使用。枸橼酸钠对凝血V因子有较好的保护作用,使其活性降低,故常用于凝血象的检查,也用于红细胞沉降率的测定。

抗凝机制:

枸橼酸盐主要用于止血学检验及血沉的测定。因其毒性小,也用于输血保养液中。其抗凝机制是枸橼酸盐与血中钙离子形成可溶性螯合物,从而阻止血液凝固。

4.草酸钠:

草酸盐是通过其草酸根与血液中的Ca2+离子形成草酸钙沉淀,使其无凝血功能。

草酸钾常用于检验用血液样品的抗凝。在试管内加饱和草酸钾溶液2滴(或10%溶液0.2ml),轻轻敲击试管,使溶液分散到管壁四周,置80℃以下的烘箱中烤干(烘烤温度过高,会使草酸钾分解为碳酸钾而失效),每管能使3~5ml血液不凝。供钾、钙含量测定的血样不能用草酸钾抗凝。

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