带你领略不同的化学发光试剂
发布时间：
2020-09-19
将免疫反应和化学发光反应相结合,藉以检测抗原或抗体的技术。它是将发光物质或酶标记在抗原或抗体上,免疫反应结束后,加入氧化剂或酶底物而发光,通过测量发射光强度,根据标准曲线测定待测物的浓度。CLIA的主要优点是灵敏度高、标记物有效期长、检测范围宽,可实现全自动化等
酶促反应的发光底物：鲁米诺，AMPPD等
直接化学发光试剂：吖啶酯以及衍生物
电化学发光剂：三联吡啶钌
酶促反应的发光底物：
是利用标记酶的催化作用，使发光剂（底物）发光，这一类需要酶催化后发光的发光剂称为酶促反应发光剂。
鲁米诺的发光原理：
鲁米诺在碱性条件下，过氧化氢（氧化剂）以及酶的存在下，生成一种具有发光性能的电子激发态的中间体3-氨基邻苯二甲酸。由激发态转化为基态的过程中，以光子的形式释放出的能量，波长位于可见光的蓝色部分。
鲁米诺-辣根过氧化物酶标记的化学发光免疫分析:
该分析系统采用辣根过氧化物酶（HRP）标记抗原（或抗体），在与反应体系中的待测物标本与固相载体发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-酶（HRP）标记抗体的复合物，这是加入鲁米诺发光剂，过氧化氢和发光增强剂是产生化学发光。
AMPPD的发光原理：
AMPP在碱性条件下，被AP（碱性磷酸酶）酶解生产相当稳定的AMP-D阴离子，其有2~30min的分解半衰期，发出波长为470nm的持续性光，在15min时其强度达到高峰，15~60min内光的强度保持相对稳定。
AMPPD-碱性磷酸酶（AP）标记的化学发光免疫分析:
该分析系统以碱性磷酸酶标记抗原（或抗体），在与反应体系中的待测物标本与固相载体发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-酶（AP)标记抗体的复合物，这时加入AMPPD发光剂，碱性磷酸酶使AMPPD脱去磷酸根基团而发光。
直接化学发光底物：
该底物在发光免疫分析过程中不需要酶的催化作用，直接参与发光反应，它们在化学结构上有产生发光的特有基团，可直接标记抗原或抗体。
吖啶酯：
在碱性条件小被过氧化氢氧化时，发出波长为470nm的光，具有很高的发光效率，其激发态产物N-甲基吖啶酮是该发光反应体系的发光体。
吖啶酯标记的化学发光免疫分析：
用吖啶酯直接标记抗体（抗原），与待测标本中相应的抗原（抗体）发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-吖啶酯标记抗体的复合物，这时只需加入氧化剂（过氧化氢）和氢氧化钠使成碱性环境，吖啶酯在不要催化剂的情况下分解，发光。
鲁米诺,吖啶酯,化学发光底物,抗原,抗体
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