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病毒保存液除了RNA型外还有DNA型吗?

2020/09/21 17:05
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我们的病毒保存液通常分为两种类型,灭活型和非灭活型,不过这两者类型目前都是针对RNA病毒的,这主要是因为当今疫情下的冠状病毒都属于RNA病毒。病毒实际上有DNA病毒和RNA病毒,那么病毒保存液能适用于DNA病毒吗?

答案是不能直接用于DNA病毒的采样,经过调整则可以适用。不管是哪种类型的病毒保存液,最终目的都是保护病毒核酸在体外不会迅速降解,便于特定核酸序列扩增达到检测的目的。所以将RNA型病毒保存液中的Rnase酶抑制剂换成Dnase酶抑制剂即可,这样就能保证病毒DNA不会降解,从而达到检测的目的。

DNA和RNA都是控制一切生命活动的遗传物质,统称核酸,RNA病毒有着远超DNA病毒的突变型,在遗传表达上,DNA与RNA又扮演着怎样的角色呢?

DNA、RNA及对应密码子的碱基

DNA转录RNA,RNA翻译蛋白质

细胞间期,染色体不再受到纺锤体的牵引作用,开始松散,逐步去螺旋。这是DNA逐渐开始与外界接触,当接触到与其碱基序列配对的RNA时就会与之配对,这就是转录过程。RNA转录完成后,就会和hnRNP一起穿过核孔到细胞质中去。然后RNA会遇到核糖体,并开始翻译合成蛋白质。

DNA和RNA的归宿

内切酶将DNA从染色体上剪切下来,带上鸟苷酸的帽子离开细胞核到细胞液中,通过解旋酶由双链变成单链,通过DNA糖苷酶切除核苷酸T,再通过AP核酸内切酶(剪切掉DNA 5'端脱嘌呤和脱嘧啶位点的蛋白质酶)、DNA聚合酶、连接酶进行短修复,这样的单链便有了RNA才有的核苷酸U,最终遇到DNase便被逐步水解。RNA则是脱离多聚核糖体后,利用在核糖体中翻译出的RNase直接把自己水解掉。DNA和RNA水解后的核苷酸都会进入细胞核开始下一个核酸合成过程。

其实DNA和RNA都是产生生命奇迹的基础物质,两者各司其职又非常相似,都参与生命遗传信息的表达,只拥有蛋白质和核酸结构的病毒也只是核酸不同,所以对应的病毒保存液也是非常相似的,区别只是抑制核酸水解的酶不一样。

 

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Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常见的生物缓冲液,可用于整个DNA提取过程。从多种来源提取过程中,DNA对pH敏感。在细胞裂解,去除不需要的细胞成分和沉淀过程中,可以使用tris来维持稳定的pH值。另外,它在细胞裂解中也起到特别重要的作用。
生物缓冲剂是电泳技术的重要组成部分,一般将其添加到溶液当中,以在电流通过样品时使pH稳定。此外,缓冲剂还能提供电泳迁移时所需的离子。
谷氨酸脱氢酶(简写GDH)是生物体代谢途径中一种重要的酶类。该酶广泛存在于各种高等植物、生物及动物体内,它在生物体内氮、碳代谢过程中起着至关重要的作用

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