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三羟甲基氨基甲烷THAM应用的缓冲液体系

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三羟甲基氨基甲烷THAM应用的缓冲液体系

2020/09/23 17:05
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三羟甲基氨基甲烷,英文名Tromethamine或Trometamol,简称THAM,它是一种应用非常广泛的有机试剂,可用于制作药物、有机合成、生物缓冲剂等。其中在生化实验中,许多蛋白质及核酸相关的实验都需要用THAM作为生物缓冲剂。

THAM可由甲醇与二氯甲烷或硝基甲烷在催化剂下高压反应,然后经氮气、氢气转换制得。THAM极易溶于水,本身显碱性,作为缓冲剂时通常需要配合酸一起使用,比如THAM-HCl缓冲液就是比较常用的,除此之外还有许多其他的缓冲液体系。

THAM+HCl或THAM盐酸盐:pH=7.5~8.5,在生物化学实验中常用的pH值为6.8、7.4、8.0、8.8。THAM被广泛用于生物化学和分子生物学实验中的缓冲液的制备,甚至有超过磷酸盐(NaH2PO4,Na2HPO4)缓冲液的趋势。

三羟甲基氨基甲烷THAM

THAM-盐酸缓冲液

THAM-磷酸盐缓冲液: pH=5.0~9.0,磷酸有二级解离,缓冲的pH值范围很广。

TE缓冲液,THAM+EDTA,可用于DNA的稳定和存储,灭活型病毒保存液

TAE:THAM+EDTA+醋酸

TBE:THAM+EDTA+硼酸

均可作为电泳缓冲液,琼脂糖凝胶电泳,聚丙烯酰胺电泳

电泳液,电泳时长时间电泳将会使正极变酸,负极变碱,缓冲系统应该有较强的缓冲能力,使溶液两极的pH保持基本稳定。

因为Tris碱的碱性较强,所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液;对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。

需要注意的是THAM缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大,缓冲液稀释十倍,pH值的变化大于0.1,而且易吸收CO2所以需要密封。德晟生产的THAM主要就是用于生物缓冲剂的,与用于药物的缓血酸胺有差异,需要加以区别。

 

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Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常见的生物缓冲液,可用于整个DNA提取过程。从多种来源提取过程中,DNA对pH敏感。在细胞裂解,去除不需要的细胞成分和沉淀过程中,可以使用tris来维持稳定的pH值。另外,它在细胞裂解中也起到特别重要的作用。
生物缓冲剂是电泳技术的重要组成部分,一般将其添加到溶液当中,以在电流通过样品时使pH稳定。此外,缓冲剂还能提供电泳迁移时所需的离子。
谷氨酸脱氢酶(简写GDH)是生物体代谢途径中一种重要的酶类。该酶广泛存在于各种高等植物、生物及动物体内,它在生物体内氮、碳代谢过程中起着至关重要的作用

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