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磁珠法提取试剂常见成分及原理解析

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磁珠法提取试剂常见成分及原理解析

2020/09/28 17:05
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磁珠法核酸纯化技术采用了纳米级磁珠微珠,这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团,能同核酸发生吸附反应。硅磁(Magnetic Silica Particle)就是指磁珠微珠表面包裹一层硅材料,来吸附核酸,其纯化原理类型于玻璃奶的纯化方式。那么采用磁珠法提取,试剂里都有哪些常见的成分呢,其原理又是怎样的。德晟小编在此依次列出一些常见的成分。

SDS(十二烷基硫酸钠)——性质:

1、阴离子表面活性剂:对人体微毒;

2、优异的发泡剂:广泛用于洗衣粉、牙膏、洗发水、灭火器;

3、易溶于热水:当水温高于8℃(≈)时,SDS的溶解度随水温升高而急剧升高。当水温升至70℃(≈),溶解度升高不明显。

SDS(十二烷基硫酸钠)——作用:它能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白分子的二、三级结构,使蛋白质变性。在高温下可以破坏蛋白质与核酸的结合,促进核酸释放。

德晟TRIS缓冲液

蛋白酶K(Protein K):是一种从白色念珠菌分离出来的强力蛋白溶解酶,具有很高的比活性,是DNA提取的关键试剂。DNA提取中,主要作用是酶解与核酸结合的组蛋白,使DNA游离在溶液中 。

聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100——曲拉通):曲拉通X-100是一种非离子表面活性剂,在水中不解离,在溶液中稳定性高,不易受强电解质无机盐类的影响,能与生物膜中的磷脂等脂质结合形成可溶性复合物;疏水端也能与膜蛋白的疏水区结合形成复合物,溶解于溶液中。

异硫氰酸胍(GITC):强用力的蛋白质变性剂,能迅速溶解蛋白质,导致细胞结构破碎,核蛋白由于其二级结构的破坏消失而迅速与核酸分离。GITC也是经典RNA提取试剂TRIZOL的主要成分。

乙二胺四乙酸(EDTA):是一种优良的钙、镁离子螯合剂。抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用(DNase作用时需要一定的金属离子作辅基)。

Tris-Hcl:三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与盐酸混匀后形成的缓冲剂,为裂解液及核酸提供一个比较适宜的环境,德晟研发生产的Tris就是一个很不错的选择。

  经典的裂解液几乎都含有去污剂 (如 SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20 等) 和盐 (如 Tris、EDTA、NaCl 等)。盐的作用,除了提供一个合适的裂解环境 (如 Tris),还包括抑制样品中的核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏 (如 EDTA)、维持核酸结构的稳定 (如 NaCl) 等

以上试剂中,德晟目前有在销售的有乙二胺四乙酸和TRIS,TRIS-HCL,这几种产品的市场反馈都很好,另外德晟的灭活型病毒保存液中就含有裂解液,可快速裂解病毒,释放核酸,产品销量一直很好。

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