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生物缓冲剂TAPS溶液的配制

2020/10/12 13:30
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生物缓冲剂TAPS是生化实验中常用的一种维持反应体系pH值的生化试剂,被广泛用在的关于核酸DNA和RNA的实验中。其全称为N-三(羟甲基)甲基-3-氨基丙磺酸CAS:29915-38-6,缓冲范围是7.7-9.1。

TAPS分子中含有3个羟基,亲水性好,极易溶于水,每100克水能溶解的TAPS达到50g,因此可直接将TAPS溶于去离子水配制溶液。TAPS可看成是一个三羟甲基氨基甲烷Tris的氨基上连着丙磺酸基团,它可以由Tris与1,3-丙磺酸内酯在醇溶液的合成。

TAPS配制成缓冲溶液时通常用氢氧化钠碱液来调节pH值。首先称量TAPS粉末和氢氧化钠固体的质量(TAPS相对分子质量为243.28,氢氧化钠是40),然后分别配制成溶液,并作标记A液、B液。

生物缓冲剂TAPS试剂粉末

根据所需要的平pH值参考如下比例来调节AB两种溶液的混合比例:

pH 4.6  1,000ml(A)+0ml(B)      (A):(B)=5:0

pH 7.8  1,000ml(A)+200ml(B)   (A):(B)=5:1

pH 8.3  1,000ml(A)+400ml(B)   (A):(B)=5:2

pH 8.6  1,000ml(A)+600ml(B)   (A):(B)=5:3

 pH 9.0  1,000ml(A)+800ml(B)   (A):(B)=5:4

如果反应体系需要排除钠离子则用氢氧化钾代替氢氧化钠,配制溶液时温度控制在室温20度。如果需要配制更精确pH值的缓冲体系,可以先按上述方法配制,然后用pH计测量,再缓慢添加A液或者B液来进行调节。

TAPS也常用其它试剂配合使用,比如10X Tris-TAPS-EDTA 缓冲液,组份包含500 mM Tris; 500 mM TAPS; 10 mMEDTA。Tris显碱性,与TAPS配合使用则不需要再添加其它酸。

除了用于DNA筛选和RNA样本的实验之外,TAPS还可以用于冻干燥过程中氧合血红蛋白的保护剂,可有效地保护氧合血红蛋白防止其氧化为高铁血红蛋白,保证其携氧功能。毛细管区带电泳进行蛋白微量分析的背景电解质及电泳缓冲液也可以使用TAPS。

德晟生产的TAPS是用Tris与1,3-PS合成的,由于公司生产有较多的Tris,在成本和产品质量上都比较有优势,无论是对于国内还是国外的客户来说,都是比较好的选择。

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